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反轉錄酶的選擇

RT-PCR反轉錄酶的選擇:

1. Money 鼠白血病病毒(MMLV)反轉錄酶:有強的聚合酶活性,RNA酶H活性相對較弱。zui適作用溫度為37℃。

2.禽成髓細胞瘤病毒(AMV)反轉錄酶:有強的聚合酶活性和RNA酶H活性。zui適作用溫度為42℃。

3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜熱微生物的熱穩定性反轉錄酶:在Mn2+存在下,允許高溫反轉錄RNA,以消除RNA模板的二級結構。

4.MMLV反轉錄酶的RNase H-突變體:商品名為Superscript 和SuperScriptⅡ。此種酶較其它酶能多將更大部分的RNA轉換成cDNA,這一特性允許從含二級結構的、低溫反轉錄很困難的mRNA模板合成較長cDNA。

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