原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
產品名稱:禽流感病毒H5N2亞型試劑盒熒光PCR法
產品貨號:XG-R63247
規格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA血纖肽B,人質量規格:>95%,BRFibrinopeptide
B, human
GPHA2 Others Human 人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖維結合素樣神經肽;分裂FLRF酰胺質量規格:>95%,BRFMRF-like
Neuropeptide;Schisto FLRF amide
CM-M045小鼠小腸粘膜上皮細胞完全培養基100mLG-R-G-D-T-P質量規格:>95%,BRG-R-G-D-T-P
TE-1細胞,人食管癌細胞 人腦瘤細胞,SF17細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S3甘丙肽,豬質量規格:>95%,BRGalanin,
porcine
Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2豆甾醇(標準品)質量規格:95%,標準品,大豆來源Stigmasterol
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta
secretase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯硫(分析標準品,>99%(GC))Diphenyl sulfide質量規格:分析標準品,>99%(GC)
人主動脈平滑肌細胞完全培養基 100mL4,4'-二氨基二苯(ODA)(標準品)4,4′-Diaminodiphenyl
ether質量規格:分析標準品
S-180細胞,小鼠肉瘤細胞 THP-1(單核細胞白血病) 人細胞;C-33A二十二烷(分析標準品,≥99.5%(GC))Docosane質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)
集落刺激因子4,4'-二氨基二苯硫(標準品)4,4'-Thiodianiline質量規格:分析標準品
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1
(A/USSR/90/1977) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙位十二內酯(分析標準品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone質量規格:分析標準品,≥98.5%(GC)
DU 145 人前列腺癌細胞乙酰乙酸1公斤
SW480 [SW-480]人結腸腺癌細胞 SW480 [SW-480] human colon
adenocarcinoma cells 1640+10% FBS三氧化二;氧化;綠 ChroMic
oxidq;ChroMq grqqn;Grqqn cinncbcr;cncdonis grqqn;ChroMiuM(III)oxidq 1308-38-9
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)1-基乙酸 1-acetic acid (≥95%, NAA) 86-87-3
25G 通用試劑
人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse霉菌和酵母菌顯色培養基200張/盒RT
人癌細胞;MCF7(N'N二甲基酰胺)
MDA-MB-231, 人癌細胞wo7iumCHLORIDE錄化鈉ACS級,美國藥典級,歐洲藥典級白色精細顆粒粉末RTsigma
人多發性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826] 大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養基 100mL2′-脫氧鳥苷-5′-... 2′-Deoxyguanosine 5′-monophosphate
d... 33430-61-4 250MG 通用試劑
肝內膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)六亞基四安;??巳?span lang="EN-US">;
屋洛托品