柯薩奇病毒B3型試劑盒熒光PCR法

產品名稱：柯薩奇病毒B3型試劑盒熒光PCR法
產品貨號：XG-R63375
規格：50T
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。

特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。
應用案例：
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽性對照（以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應（20  μL 體系，在樣品制備室進行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復，下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加）

PCR服務：
公司推出，該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請提供已知的全長基因序列。
（03）請提供盡可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。
（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準：
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。

小鼠成纖維細胞MLF骨抑制素（1-5）酰胺，人，牛，狗，大鼠，小鼠，兔，馬質量規格：>95%,BROsteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)

AXR1 Others Human 人 AXR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 骨抑制素酰胺，人質量規格：>95%,BROsteostatin amide (human)

大鼠上皮細胞完全培養基 100mLp60 v-結構域（137-157）質量規格：>95%,BRp60 v-src (137-157)

LTPA小鼠胰腺癌細胞 LTPA mouse pancreatic cancer cells 1640+10%FBSp60 C-結構域底物ⅠLys(生物素)質量規格：>95%,BRp60c-src Substrate ILys(Biotin)

NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)構樹堿A（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品 Broussonetine A
FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標簽)丙泊酚葡萄糖苷酸Propofol Glucuronide質量規格：美國進口

A3(人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml4-羥基丙泊酚4-Hydroxy Propofol質量規格：美國進口

人滑膜細胞cDNAHS cDNA2,2-二甲基-4-異丙基-1,3-苯并二茂2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole質量規格：美國進口

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基丙泊酚4-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

人內臟脂肪細胞完全培養基 100mL4-羥基丙泊酚1-O-β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口
C2C12, 小鼠肌原細胞酸鋇shēng huà shì jì容量：RT500毫升

RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 轉化的非洲綠猴腎細胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;

人鼻咽癌細胞;CNE-2Z重蒸酚 () Phenol 108-95-2 250ML 通用試劑

DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫-鉀ATP酶測試盒50支/包RT

柯薩奇病毒B3型試劑盒熒光PCR法人導管癌細胞;ZR-75-1(DNA高分子量標準)
GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 人細胞裂解液 (陽性對照) YGC瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升

人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH72(5H)-同 98% 2(5 H)-THIOPHqNONq 3324/3/3

敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 貓腎細胞，CRFK細胞 Cyc-Tag(S49)細胞，小鼠T細胞瘤細胞硫柳鈉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人胚肺成纖維細胞;HFL-I刃天青shēng huà shì jì容量：100克

CRP Others Mouse 小鼠 CRP / PTX1 人細胞裂解液 (陽性對照) PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝