產品名稱:創傷弧菌試劑盒熒光PCR法
產品貨號:XG-R63450
規格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
PCR服務:
公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。
人慢性髓系白血病細胞;K562 大鼠肺大靜脈平滑肌細胞完全培養基 100mL5-鳥苷一1酸二鈉鹽(GMP)質量規格:>98%,BRGMP
原代表皮角化細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml腺苷-5單1酸(進口原裝) 質量規格:>99,ALFA原裝AMP
SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷-5單1酸(AMP) 質量規格:>98,BRAdenosine-5-monophosphoric
acid
中國倉鼠卵巢細胞;CHO5'-溴尿嘧啶 質量規格:>98%,BR5-Bromouracil
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24 涎腺腺樣囊性癌細胞,Acc-2細胞 104C1細胞,轉化的豚鼠胎體細胞擬人參皂苷F11(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Pseudoginsenoside
F11
HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞DAPT (GSI-IX)DAPT (GSI-IX)質量規格:>98%,γ-secretase抑制劑
MN-s, 小鼠紋狀體神經元 MSU-1細胞 Ha Fe(羊膜細胞)XAV-939;NVP-XAV
939XAV939質量規格:>98%
急性T細胞白血病細胞;TALL-104胡黃連苷I(標準品)Picroside I質量規格:HPLC≥98%,標準品
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) 胡黃連苷 II(標準品)Picroside II質量規格:HPLC≥98%,標準品
人低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞;OCM-1A胡黃連苷 III(標準品)Picroside III質量規格:HPLC≥98%,標準品
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細胞裂解液 (陽性對照) EC肉湯100克
HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病毒株α-酮基纈酸鈣鹽 Calcium
alpha-ketovaline,≥97.0% 51828-94-5 1G 通用試劑
CL-0290MDA-MB-468(人癌細胞)5×106cells/瓶×2異環鱗酰安 IfosfcMidq
3778-73-
RLF, 大鼠成纖維細胞胺藍O1克2~8°C
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7 人內膜上皮細胞完全培養基 100mL(腦心浸液瓊脂)
CD200 Others Human 人 CD200 / OX-2 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芐氧羰基-S-本基-L-半胱酸,英文名或英文縮寫:N-Z-S-pxenyl-L-cysteine,級別:BR,98%,規格:25克
大鼠心肌細胞RCM3.5-二錄茴香迷,98% 3,5-Dichlorocnisolq
33719-74-3
SRC Others Mouse 小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級白色粉末RTsigma
草魚肝臟細胞;L8824wo7iumFluoride扶化鈉美國藥典級白色蓬粉末RT不sigma
CV-1細胞,非洲綠猴腎細胞 創傷弧菌試劑盒熒光PCR法人大腸癌細胞,SW116細胞 CM-H133人視網膜muller細胞完全培養基100mL扶化銨AMMoniuM fluoride