豬鏈球菌Ⅱ型試劑盒熒光PCR法

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。

產品名稱：豬鏈球菌Ⅱ型試劑盒熒光PCR法
產品貨號：XG-R63653
規格：50T
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。
應用案例：
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽性對照（以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應（20  μL 體系，在樣品制備室進行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復，下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加）

新生兒表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)綠原酸(標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Chlorogenic acid

IL17RD Others Canine 狗 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照) 綠原酸質量規格：HPLC≥98%,BRChlorogenic acid

大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106氯化兩面針堿（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Nitidine chloride

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 舌鱗癌細胞，Tca-8113細胞 MADB106細胞，大鼠腺癌細胞系氯化矢車菊素,(標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Cyanidin Chloride

人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2蘆薈大黃素質量規格：>96%,BRAloeemodin
RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸（標準品）Aceclofenac質量規格：UV法含量測定

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209質量規格：>98%，選擇性JAK2抑制劑

人角膜細胞總RNAHK NA鹽酸阿扎司瓊（標準品）Azasetron 質量規格：含量測定

小鼠顆粒神經元(MGC)(1×106)鹽酸普萘洛爾（標準品）Propranolol 質量規格：溶出度檢查

貓源細胞美他多辛（標準品）Metadoxine質量規格：HPLC法含量測定
人神經少突起前質膠質細胞完全培養基 100mLMalonicacid胡蘿卜酸50毫克BR

JB6-C30細胞，小鼠皮膚細胞 J82(膀胱癌細胞) 犬腎細胞;MDCK/IgR3-溴-1-炳醇 3-BroMo-1-propcnol 67-18-9

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)litxiumacetatedihydrate醋酸100克4N，99.99%

CAL-27(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1mlBentonite膨潤土5克BR，99%

人骨骼肌成肌細胞HSkMM109-76-21,3-二基1,3-Diaminopropane
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) TBHB3-羥基-2,4,6-三溴本酸sigma

CL-0205Sf-9(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×210-脫?；涂ǘ?span lang="EN-US">III 10-Dqccqtylbcccctin III 3981-86-2

Dami細胞，巨核細胞 人分泌A2抗體B細胞,BB7.2細胞 人導管癌細胞;HCC382-本加醋酯 Mqthyl o-toluctq 89-71-4

A673(人橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2L-絲酸鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：H-Ser-OmeoHCl，級別：特，98%，規格：5克

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 59-14-35-溴-2’-脫氧尿苷(-20℃)Broxuridine
PCR服務：
豬鏈球菌Ⅱ型試劑盒熒光PCR法公司推出，該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請提供已知的全長基因序列。
（03）請提供盡可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。
（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準：
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。