犬細小病毒(CPV)試劑盒熒光-PCR法

產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit 偶氮熒光桃紅,酸性紅1  Azophloxine  質量規格：BS

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit 曙紅Y,醇溶劑紅 43  Eosin Y ,alcohol solution  質量規格：AR

人解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit 曙紅B  Eosin B  質量規格：BS

人解整合素樣金屬蛋白酶15(ADAM15)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit 固深紅 GBC  Fast Garnet GBC Salt  質量規格：BS,90%

人解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit 固紅 3 GL  Fast Red 3 GL Salt  質量規格：BS

人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit 固紅 KL鹽  Fast Red KL Salt  質量規格：BS

人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 固紅B  Fast Red B Salt  質量規格：>90%

人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 固紅-萘磺酸 TR  Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt  質量規格：≥90%(TLC)

人金葡菌腸(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SE 96T/48T 麗春紅S  Ponceau S  質量規格：BS

人金屬硫蛋白(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMetallothionein,MT 96T/48T 環丙貝特  Ciprofibrate  質量規異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T 藍[pH指示劑]  Bromochlorophenol Blue  質量規格：pH指示劑

大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit 乙基橙[pH指示劑]  Ethyl Orange  質量規格：pH指示劑

英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯素(adiponectin)ELISAKit規格：96T/48T 4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))  4-Ethoxychrysoidine   質量規格：>95.0%(T)

高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20 DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑  DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]  質量規格：用于蛋白質組分析，用于高效液相色譜標記，熒光染料，用于質譜的衍生化試劑

ELISAKitf-Hb人游離血紅蛋白規格：48T/96T 2,3-萘二醛(>99.0%(GC))  2,3-Naphthalenedialdehyde  質量規格：>99.0%(GC)

小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 ，英文名： Gzms-B ELISA Kit DBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))  DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]   質量規格：>98.0%(HPLC)

大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC))  N-(1-Pyrenyl)maleimide  質量規格：>97.0%(HPLC)
CM-R067大鼠腎足突細胞完全培養基100mL2-(5-溴-2-偶氮)-5-(二乙基)本酚100毫克保存：-20℃

EC109，人食管癌細胞CBZ-D-纈酸 CBZ-D-Valine,99% 1685-33-2 5G 通用試劑

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0926 人腦動脈血管平滑肌細胞完全培養基 100mL錄加醋異炳酯(約30%的本,約2mol/L)(+4℃) Isopropyl xlonofonmctq108-3-6

大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]動力-吲哚-尿素培養基基礎shēng huà shì jì容量：25克

IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 79803-73-93-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸鈉 (MOPSO-Na)MOPSO wo7ium salt
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。