羊肺炎支原體（MO）試劑盒熒光-PCR法

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒rabbitsolubleP-selectin,sP-selectin 96T/48T 羅布麻寧；夾竹桃麻素(標準品)  Acetovanillone  質量規格：GC>98%,標準品

兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40L 96T/48T 羅布麻寧；夾竹桃麻素  Acetovanillone  質量規格：>98%,BR

兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測試劑盒rabbitSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1 96T/48T 虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷  Polydatin  質量規格：HPLC>97%,BR

兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA檢測試劑盒RabbitsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR 96T/48T 虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷(標準品)  Polydatin  質量規格：HPLC≥98%,標準品

兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1 96T/48T 十八烷醇,1-十八醇(標準品)  1-Octadecanol  質量規格：>98%,標準品

兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA檢測試劑盒Rabbitsolubleadhesionmolecules,Sam 96T/48T 十八烷醇,1-十八醇  1-Octadecanol  質量規格：>98%

兔子球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒rabbitImmunoglobulinA,IgA 96T/48T Ruxolitinib (INCB018424)  Ruxolitinib (INCB018424)  質量規格：>99%

兔子球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒rabbitImmunoglobulinE,IgE 96T/48T MK-1775,MK1775   MK-1775  質量規格：>98%,Wee1激酶抑制劑

兔子球蛋白G(I羊肺炎支原體（MO）試劑盒熒光-PCR法gG)ELISA檢測試劑盒rabbitImmunoglobulinG,IgG 96T/48T PD184352 (CI-1040)  PD-184352 (CI-1040)  質量規格：>99%,MEK1/2抑制劑

兔子球蛋白M(IgM)ELISA檢測試劑盒rabbitImmunoglobulinM,IgM 96T/48T 2-脫氧-D-葡萄糖  2-Deoxy-D-glucose  質量規格：>98%,BR
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷(標準品)  Polydatin  質量規格：HPLC≥98%,標準品 兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA檢測試劑盒RabbitsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T

十八烷醇,1-D-F[=4-(氨磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(N)(T))  ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]  質量規格：>98.0%(N)(T)

Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISAKit 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 二茂鐵乙酸(>97.0%(GC))  Ferroceneacetic Acid  質量規格：>97.0%(GC)

HumanAldolase,ALDELISA試劑盒人縮酶(ALD)ELISA試劑盒規格：96T/48T (肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記)  (Hydrazinocarbonyl)ferrocene  質量規格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記

植物S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20 二甲亞砜(>99.0%(GC))  Dimethyl Sulfoxide  質量規格：>99.0%(GC)

Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒規格：96T/48T 1,2,3,4-四氫萘(>98.0%(GC)  1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene  質量規格：>98.0%(GC)

小鼠可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白(LGALS3BP)ELISA試劑盒 ，英文名： LGALS3BP ELISA Kit 對茴香醛乙醇溶液(含乙酸和硫酸)  p-Anisaldehyde (contains Acetic Acid, H2SO4) Ethanol Solution  質量規格：用于薄層色譜顯色劑

人可溶性腺苷酸環化酶(sAC)ELISA檢測試劑盒HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit 96T/48T 二甲亞砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC))  Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D  質量規格：>99.0%(GC)
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株 單核細胞型瘤細胞,THP 1細胞 FaDu(人咽鱗癌細胞)2-本并噻唑shēng huà shì jì容量：5克

野生型人c-kit受體細胞株;A7d3-叔丁基-4-羌基茴香迷 3-tqrt-Butyl-4-xy7noxycnisolq 11-00-6

SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二基奈shēng huà shì jì容量：100克

大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1metxylpalmitate軟脂酸100克2.5N，99.5%

MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 142-28-91,3-二錄1,3-Dichloropropane;Trimetxylene dichloride

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