幽門螺旋桿菌(HP)試劑盒熒光-PCR法

產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
74805-90-6甲基麥冬高黃酮A品牌  methylophiopogononeA   組織1酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續循環定1比色法定量檢測試劑盒20

7437-55-08-香葉草氧基補骨脂素廠家  8-Geranyloxypsoralen    組織1酸二酯酶4(PDE4)活性熒光定量檢測試劑盒10

7437-54-9甲基辛弗林鹽酸鹽廠家  4-hydroxyephedrine    組織1酸二酯酶4(PDE4)活性酶連續循環光譜法定量檢測試劑盒20

7432-28-2五味子醇甲品牌  Schisandrin  組織1酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒10

74285-86-2雷酚內酯說明書  Triptophenolide    組織1酸二酯酶3(PDE3)活性酶連續循環光譜法定量檢測試劑盒10
犬血栓調節蛋白(TM)試劑盒 Dog thrombomodulin,TM ELISA Kit  13241-28-6大黃酚-8-O-β-D-葡萄糖苷說明書  Chrysophal 8-O-glucoside

英文名稱MouseAILELISAKIT小鼠(AIL)規格：96T/48T  113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌  Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside

腸侵襲性大腸桿菌(EeroinvasiveE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20  514-47-6大戟二烯醇規格  Euphol

RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒規格：96T/48T  28978-02-1大薊苷廠家  Pectolinarin

小鼠足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ，英文名： PCX ELISA Kit  539-15-1大麥芽堿說明書  Hordenine
RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1617-53-4穗花杉雙黃酮品牌  Amentoflavone

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)ELISA試劑盒 ，英文名： IDO1 ELISA Kit  572-31-6黃杞苷規格  Engeletin

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA檢測試劑盒MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit 96T/48T  57420-46-98-O-乙酰山梔苷甲酯廠家  8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester

人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit  64421-28-9山梔苷甲酯說明書  Shanzhiside methylester

Ratai-gonadoopin-releasinghormonereceptoraibody,GHR-AbELISAKit大鼠促性腺釋放受體抗體(GHR-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T  27741-01-1京尼平苷酸品牌  Geniposidic acid
HCT 116(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-RAPIDWESTERNBLOTTINGKIT-RABBIT-WT快速Western Blotting試劑盒-兔(濕轉)FROZENsigma

活/死細胞染色試劑盒CSK1，2-炳二醇二醋酯 1,2-Propylqnqglycol diccqtctq 63-84-7

GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 基鈷安速(-20℃) Mqcobclcmin 134-22-4

人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7天青B，英文名或英文縮寫：Azure B，級別：高，90%，規格：25克

HHCC細胞，人肝癌細胞 小鼠肺癌細胞,Lewis細胞 牦牛皮膚細胞;BMU-S1344-25-2D-脯酸D-Proline;(R)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid;(R)-(+)-Proline;D-Pro
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
幽門螺旋桿菌(HP)試劑盒熒光-PCR法將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。