儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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產品名稱
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恙蟲病東方體（OT）試劑盒熒光-PCR法
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規格
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50T
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貨號
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XG-R64029
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產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM）
2μl
引物2（10PM）
2μl
Taq酶（2U/μl）
1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至
50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
人肺間充質干細胞cDNAHPMSC cDNA脫羧氯雷他定/地氯雷他定(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Desloratadine
豬源細胞 皮膚細胞，CCD-1095Sk細胞 ZM755細胞，615小鼠滑膜肉瘤瘤株地塞米1酸鈉質量規格：>98%,USPDexamethasone Phosphate
人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1地塞米1酸鈉（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Dexamethasone Phosphate
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素HA1
(Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) D-蛋氨酸質量規格：>98%,BRD-Mine
CL-0292MKN45(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2索非布韋質量規格：>99%,BRSofosbuvir
(GS-7977)
人表皮角質細胞cDNAHEK cDNA培美曲塞-15N,13C5Pemetrexed
- Labeled 15N,13C5質量規格：美國進口
RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-硝基-L-精氨酸甲酯N'-Nitro-L-arginine-methyl
ester 質量規格：>98%
人脂肪細胞完全培養基 100mLN-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)N-Benzoyl-L-tyrosine
ethyl ester質量規格：>98%
ZA1細胞，轉S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610
[R1610]AEBSF絲氨酸抑制劑AEBSF HCl質量規格：>98%,BR
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白AEBSF(進分)AEBSF HCl質量規格：>97%,進分TCI A2215
恙蟲病東方體（OT）試劑盒熒光-PCR法Jurkat, Clone E6-1人T細胞白血病細胞 Jurkat, Clone
and E6-1 in human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,5-萘二磺酸四水(>98%,BR)質量規格：>98%Naphthalene-1,5-disulfonic
acid tetrahydrate
FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白色酚AS醋酸鹽(>98%,BC)質量規格：>98%,BCNaphthol
AS acetate
BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質細胞-HEK-a氯代丁二乙(>98%,BR)質量規格：>98%,BRNCS,
N-Chlorosuccinimide
人胃癌細胞;MKN-45n-Dodecyl-b-D-thiomaltoside質量規格：BRn-Dodecyl-b-D-thiomaltoside
人卵巢微血管內皮細胞(HOMEC) ( 5×105 )1,4-雙[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)1,4-Bis[(1H-imidazol-1-yl)methyl]benzene
52286-58-5人參皂苷Rf說明書 Ginsenoside Rf 中性紅細胞繁殖比色法定量檢測試劑盒500
522-12-3槲皮苷規格 Quercitrin 中量/酵母細胞基因組DNA化試劑盒10
521-88-0水黃皮素廠家 Karanjin 質粒/蛋白制備樣品內濁度法定量檢測試劑盒20
521-34-6金松雙黃酮規格 Sciadopitysin 質粒/蛋白制備樣品內比色法定量檢測試劑盒20
521-32-47-去甲基銀杏雙黃酮廠家 Bilobetin 植物組織質膜(plasmamembrane)分離試劑盒20