產(chǎn)品名稱(chēng):新城疫病毒(NDV)定性試劑盒RT-PCR法
產(chǎn)品貨號:XG-R64186
規格:50T
分類(lèi):RT-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門(mén)。
原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
實(shí)驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動(dòng)物模型:原代細胞、細胞模型、動(dòng)物模型構建
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應體系中,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì )發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線(xiàn)圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線(xiàn)圖
2.TaqMan探針?lè )ǎ?br />
探針完整時(shí),報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。
應用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽(yáng)性對照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對照,只提供可以直接使用的長(cháng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對照。
2.標記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽(yáng)性對照,并且陽(yáng)性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
PCR服務(wù):
公司推出,該技術(shù)不僅實(shí)現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實(shí)驗結果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實(shí)驗皆使用進(jìn)口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長(cháng)基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來(lái)源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗,進(jìn)行實(shí)驗結果分析。
(04)實(shí)驗完成后,提供完整的實(shí)驗報告(含軟件分析結果)及引物等實(shí)驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
我公司根據客戶(hù)的樣品數量進(jìn)行不同的收費標準。
貓腎細胞;CRFKO-叔丁基-L-絲氨酸質(zhì)量規格:度98%,BRO-tert-Butyl-L-serine
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照)
Idelalisib;CAL101質(zhì)量規格:>99%,選擇性p110δ抑制劑CAL-101 (GS-1101)
CL-0395NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-蘇氨酸質(zhì)量規格:98%,BRO-tert-Butyl-L-threonine
METAP1D Others Human 人 MAP1D / Mine Aminopeptidase 1D 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) N-乙酰-D-色氨酸質(zhì)量規格:0.98N-Acetyl-D-tryptophan
人前脂肪細胞-皮下總RNAHPA-s NAD-酪氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規格:0.99H-D-Tyr-OMe·HCl
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1米諾地爾(硫酸鹽)敏樂(lè )啶(標準品)Minoxidil
Sulfate質(zhì)量規格:HPLC>98%,標準品
IL6R Others Mouse 小鼠 IL6RA / CD126 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) MQAE(氯離子熒光探針)N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium
bromide質(zhì)量規格:進(jìn)分
人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E特立氟胺A771726 (Teriflunomide)質(zhì)量規格:>99%,二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)抑制劑
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 當歸?;昝仔?span lang="EN-US">H(
標準品
)Angeloylgomisin
H質(zhì)量規格:
HPLC≥
96%,標準品
CW-2 人結腸癌細胞美曲勃龍(R-1881)Methyltrienolone質(zhì)量規格:>98%,BR
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1 人尿道上皮細胞完全培養基 100mLD-果糖-6-1酸二鈉鹽質(zhì)量規格:>95%,BRD-Fructose-6-phosphate
di salt
人心臟微血管內皮細胞RNAHCMEC miRNA5 μg白頭翁皂苷B質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Pulchinenoside B
VEGFA Others Human 人 VEGF121b / VEGF-A 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-1-28–酸;白頭翁皂苷D質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品V
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1羅漢果皂苷Iva質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Mogroside IVa
PA319細胞,人大腸癌細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞,D407細胞 人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3]3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-β-環(huán)糊精水合物(>97.0%(T))質(zhì)量規格:>97.0%(T)3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-β-cyclodextrin
Hydrate
骨骼肌細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)N-本基代shēng huà shì jì容量:100克
PTGS2 Others Human 人 PTGS2 / COX2 / PGHS-2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 5-肌苷二1酸三鈉鹽 Inosine-5'-diphosphate tri salt 71672-86-1 500MG 通用試劑
人細胞;C-33A己糖激酶(-20℃) HqXOKINcSq
9001-21-8
新城疫病毒(NDV)定性試劑盒RT-PCR法RAW 264.7細胞,單核巨噬細胞白血病細胞 人肝細胞,FL62891細胞 CL-0216SMMC-7721(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2wo7iumtaurodeoxycholat?;敲撗跄懰徕c5克BR,99%
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C1633-22-3對二二聚體[2.2]Paracyclophane