禽白血病病毒 (ALV)定性試劑盒RTPCR法

產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個(gè)位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實(shí)驗結果重復性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過(guò)程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

PCR實(shí)驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。
194851-84-8酸棗仁皂苷D品牌  Jujuboside D  英文名稱(chēng)RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規格：96T/48T

19408-84-5二氫辣椒堿規格  Dihydrocapsaicin   英文名稱(chēng)RatMotilinELISAKit大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

19309-14-9小豆蔻明廠(chǎng)家  Cardamonin   英文名稱(chēng)RatMotilinELISAKit大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

19275-46-83-異倒捻子素廠(chǎng)家  3-isomangostin   英文名稱(chēng)RatMMP-9ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)規格：96T/48T

19210-12-9哈巴俄苷品牌  Harpagoside   英文名稱(chēng)RatMMP-5ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)規格：96T/48T
小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Mouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T  37720-86-8鬧羊花V品牌  Rhodojaponin V

人精胺合成酶(SRM)試劑盒 Human spermidine syhase,SRM ELISA kit  26342-66-5鬧羊花III規格  Rhodojaponin-III

RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit大鼠血管**素1(ANG-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T  26116-89-2鬧羊花II廠(chǎng)家  Rhodojaponin-II

載玻片細胞線(xiàn)粒體復合物I蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  72520-92-4丹皮酚原苷說(shuō)明書(shū)  1-[4-methoxy-2-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-[[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-phenyl]ethanone

Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA試劑盒小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規格：96T/48T  13161-75-6北美芹素品牌  pteryxin
小鼠總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒 ，英文名： TPC ELISA Kit  568-73-0丹參酮I規格  Tanshinone I

小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit 96T/48T  568-72-9丹參酮IIA廠(chǎng)家  Tanshinone IIA

人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgM)試劑盒 Human β2-glycoprotein I(β2-GPI)aibody IgM ELISA kit  27210-57-7丹參新酮說(shuō)明書(shū)  Miltirone

rabbitTumornecrosisfactorα,TNFαELISAKit兔子壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規格：96T/48T  96574-01-5丹酚酸A品牌  Salvianolic acid A

載玻片細胞ERK蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  115939-25-8丹酚酸B規格  Salvianolic acid B
猴腎細胞;vero IgRCD4-N6-BenzoyladenineN-(5H-嘌呤-6-基)本甲先胺25克BR，98%

COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 10-酰葉醋 10-ForMylfolic ccid134-02-4

髓母細胞瘤組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml棕櫚醋酯 Mqthyl PclMitctq 11-39-0

SW13細胞，人腎上腺皮質(zhì)瘤 人癌細胞,BT-549細胞 抗溶液AMSL-NorvalineL-2-基戊酸1克BR，99%

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-734598-49-75-溴-1-茚酮5-Bromoindanone
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
禽白血病病毒 (ALV)定性試劑盒RT-PCR法60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。