犬細小病毒（CPV）定性試劑盒PCR法

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  

產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

17910-09-7莪術烯規格  Curzerene   英文名稱Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISAKit規格：96T/48T

177931-17-8三白草酮廠家  Sauchinone  英文名稱RatLHELISAKit大鼠促黃體(LH)規格：96T/48T

17680-84-1高車前苷廠家  Homoplantaginin   英文名稱RatLHELISAKit大鼠促黃體(LH)規格：96T/48T

17650-84-9山柰酚-3-O-蕓香糖苷品牌  Kaempferol-3-rutinoside   英文名稱Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細胞抗原B27(HLA-B27)規格：96T/48T

174972-80-6巴利森苷C廠家  Parishin C    英文名稱Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細胞抗原B27(HLA-B27)規格：96T/48T
小鼠載脂蛋白C3(APOC3)ELISA試劑盒 ，英文名： APOC3 ELISA Kit  59-30-3葉酸說明書  Folic acid

白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T  633-66-9硫酸小檗堿品牌  Berberine Sulfate

犬降鈣素(CALCA)試劑盒 Dog calcitonin,CALCA ELISA kit  481-53-8桔紅素規格  Tangeretin

英文名稱HumanVWFELISAKit人血管性血友病因子(VWF)ELISA試劑盒規格：96T/48T  483-15-8二氫小檗堿廠家  Dihydroberberine

化線粒體1氧比(ADP/O)定量檢測試劑盒20  80665-72-1附子靈說明書  Fuziline
小鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒 ，英文名： TF ELISA Kit  3621-36-1非洲防己堿說明書  Columbamine 

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒DuckIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T  莪術烯醇品牌 

犬游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Canine Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit  69091-17-4β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧規格  β-acetoxyisovalerylalkannin

英文名稱MouseBLC-1/CXCL13ELISAKit小鼠B-細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規格：96T/48T  6”-丙二酸沙苑子苷單酯廠家  6’’-malonate-complanatuside

冰凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  2174-59-65-去甲川陳皮素說明書  5-Demethylnobiletin
豬組胺elisa試劑盒   豬組胺試劑盒   規格型號：96T/48T   豬組胺試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬組胺試劑盒、豬組胺eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     rsodeoxycholic acid  128-13-2  中文名：熊去氧膽酸  分子式：C24H40O4 

豬組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Strontium ranelate  135459-87-9  中文名：雷尼酸鍶  分子式：C12H10N2O8S  度：98.0%  關鍵詞： 

豬總蛋白（TPS）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Royleanone  中文名：  分子式：C20H28O3  度：95.0%

豬總膽固醇elisa試劑盒   豬總膽固醇試劑盒   規格型號：96T/48T   豬總膽固醇試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬總膽固醇試劑盒、豬總膽固醇eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  rsodeoxycholic acid  128-13-2  中文名：熊去氧膽酸  分子式：C24H40O4  度：98.0%  關鍵詞：  膽烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

豬狀腺原酸   英文名稱：   Porcine Total iiodothyronine   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TT3  S-Benzyl-L-cysteine 3054/1/1  中文名：S-芐基-L-半胱氨酸  分子式：C10H13NO2S  度：98.0%
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
犬細小病毒（CPV）定性試劑盒PCR法三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。