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經典豬瘟病毒(CSFV)RNA試劑盒恒溫熒光法

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  • 產品名稱:經典豬瘟病毒(CSFV)RNA試劑盒恒溫熒光法
  • 產品型號:XG-R64269
  • 產品展商:西格
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簡單介紹

經典豬瘟病毒(CSFV)RNA試劑盒恒溫熒光法保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品描述

PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  

產品特點: 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷
靈敏度高:可檢測個位拷貝數的基因
特異性高:有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高:復孔間差異小,實驗結果重復性強
擴增性能優:擴增效率高,熒光信號強

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內**的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品名稱

經典豬瘟病毒(CSFV)RNA試劑盒恒溫熒光法

規格

48T

貨號

XG-R64269

檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

黃芪總皂苷規格  Astragaloside   組織尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量檢測試劑盒50

換規格換規格品牌  換規格   組織尿酸含量酶偶聯比色法定量檢測試劑盒20

槐角堿說明書    組織尿素比色法定量檢測試劑盒20

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷廠家  Quercetin-3-O-b-D-glucose-7-O-b-D-gentiobiosiden   組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量檢測試劑盒20

廣藿香酮規格  Pogostone   組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測試劑盒20
小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP2 ELISA Kit  36052-37-6山姜素規格  Alpinetin

鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T  19309-14-9小豆蔻明廠家  Cardamonin

犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit  24502-78-1乙酰紫草素說明書  Acetylshikonin 

英文名稱MouseAβ1-40proteinELISAKit小鼠Aβ1-40蛋白規格:96T/48T  34157-83-0雷公藤紅素品牌  Celastrol

同酸待測樣品處理試劑盒20  69659-80-9丹參酮IIA-磺酸鈉規格  Sulfotanshinone  Injection
MousesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit
小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T  芹菜素-7-O-槐糖苷規格  Apigenin-7-O-β-D-sophoroside 

小鼠左右決定因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 ,英文名: LEFTY2 ELISA Kit  7014-39-3新異甘草苷廠家  Neoisoliquiritin

鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T  23696-85-7突厥烯酮品牌  Damascenone 

犬誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit  5471-51-2覆盆子酮規格  4-(4-hydroxyphenyl)-2-butanone 

英文名稱MouseCXCL12ELISAKit小鼠B-細胞趨化因子12(CXCL12)規格:96T/48T  602-41-5硫秋水仙苷廠家  Thiocolchicoside
豬沙門氏菌抗體elisa試劑盒   豬沙門氏菌抗體試劑盒   規格型號:96T/48T   豬沙門氏菌抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬沙門氏菌抗體試劑盒、豬沙門氏菌抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Rubanthrone A  441764-20-1  中文名:  分子式:C17H14O10  度:98.0%  關鍵詞: 

豬肉毒堿脂酰轉移酶(CACTELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Solvent Yellow 3  中文名:溶劑黃  分子式:C14H15N3  度:99.0%

豬熱休克蛋白90elisa試劑盒   豬熱休克蛋白90試劑盒   規格型號:96T/48T   豬熱休克蛋白90試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬熱休克蛋白90試劑盒、豬熱休克蛋白90eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Rubanthrone A  441764-20-1  中文名:  分子式:C17H14O10 

豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Solvent Yellow 3  中文名:溶劑黃  分子式:C14H15N3 

豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Senkyunolide I  94596-28-8  中文名:  分子式:C12H16O4
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
經典豬瘟病毒(CSFV)RNA試劑盒恒溫熒光法三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。


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