PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產品特點: 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現
穩定性高：復孔間差異小，實驗結果重復性強
擴增性能優：擴增效率高，熒光信號強
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內**的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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產品名稱
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BAR基因試劑盒PCR-熒光探針法
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規格
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48T 0.2PCR管
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貨號
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XG-R64301
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檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside 英文名稱RatDesminELISAKit大鼠結蛋白(Desmin)規格：96T/48T
113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside 英文名稱RatCytochromoP450ELISAKIT大鼠細胞色素P450規格：96T/48T
113146-74-0酸漿苦味素L規格 Physalin L 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規格：96T/48T
1126032-65-2異-羅漢果皂苷V品牌 isomogroside V 英文名稱RatCytochromeCELISAKit大鼠細胞色素C(CytochromeC)ELISA試劑盒規格：96T/48T
1124-11-4川芎嗪廠家 Chuanxiongzine 英文名稱RatCystatinCELISAKit大鼠胱抑素C(CysC)規格：96T/48T
英文名稱HumanangiotensionⅠELISAKit人血管緊張素I(AngI)規格：96T/48T 63238-66-4苯甲酰烏頭原堿品牌 Benzoylhypacoitine
化線粒體氧化應激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20 烏頭原堿規格 Hypaconine
Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISA試劑盒大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規格：96T/48T 28-去甲基-β-香樹脂酮廠家 28-demethyl -β-amyrone
小鼠硬骨素(SOST)ELISA試劑盒 ，英文名： SOST ELISA Kit 71486-22-1長春瑞濱說明書 Vinorelbine
兔子壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit
96T/48T 2068-78-2硫酸長春新堿品牌 Vincristine Sulphate
載玻片細胞HISTONEH3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 480-18-2花旗松素說明書 Taxifolin
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA試劑盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒規格：96T/48T 6882-68-4槐定堿品牌 Sophoridine
小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβ2 ELISA Kit 145572-44-7槐果堿規格 Sophocarpine
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA檢測試劑盒MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit
96T/48T 152-95-4槐角苷廠家 Sophoricoside
人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗體試劑盒 Human ai U1 small nuclear
ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit
84605-18-5環黃芪醇說明書
Cycloastragenol
豬狂犬病毒抗體（RV-ab）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmasta-5,8-dien-3-ol 中文名： 分子式：C29H48O
豬口蹄疫病毒（FMDV）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmasta-5,8-dien-3-ol
570-72-9 中文名： 分子式：C29H48O 度：% 關鍵詞： 豆甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
豬可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stigmasta-5,8-dien-3-ol
570-72-9 中文名： 分子式：C29H48O
豬可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit
ELISA. 96T/48T Stellasterol 2465/11/4 中文名：星魚甾醇 分子式：C28H46O 度：96.0% 關鍵詞： 麥角甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
豬可溶性內皮生長因子受體2elisa試劑盒 豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒 規格型號：96T/48T 豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒、豬可溶性內皮生長因子受體2eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。 Stigmastane-3,6-diol 中文名： 分子式：C29H52O2 度：%
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM）
2μl
引物2（10PM）
2μl
Taq酶（2U/μl）
1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至
50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
BAR基因試劑盒PCR-熒光探針法三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。