試劑配制:
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody
Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人泛素蛋白(Ub) ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Human Ubiquitin,
Ub Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。 48T/96T。
產品名稱
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人泛素蛋白(Ub)
ELISA試劑盒操作方法
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英文名稱
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Human
Ubiquitin, Ub Elisa Kit
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貨號
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XG-H63991
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公司產品僅用于科研優勢特點:
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節省實驗經費。
樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項:
1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正?,F象,微加熱至40℃使結晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室**防護條列執行。
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2鹽酸克林霉素(標準品)Clindamycin HCl質量規格:>800μg/mg,含量測定
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin
/ HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸維拉帕米Verapamil HCl質量規格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養
原代肝實質細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml鹽酸維拉帕米(標準品)Verapamil HCl質量規格:HPLC>98%,標準品
RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸; 麥考酚酸;MPAMycophenolic
acid質量規格:>98%,BR
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0904霉酚酸; 麥考酚酸(標準品)Mycophenolic acid質量規格:HPLC>97%,標準品
貂源細胞 細胞白血病細胞,A3細胞 3T3-swiss albino細胞,小鼠胚胎成纖維細胞CPA-mN偶氮錄膦mN1克IND
人胚腎細胞;293 Cells, low passage肖醋鈰(Ⅳ)銨 Cqric cmmonium
nitnctq 16774-1-3
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New
Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二(4-甲基-5本基-2-咪唑)本shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光1克
CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2(R)-(-)-1,2-Propanediol1,2-25克AR,99%
GPT Others Rat 大鼠 GPT1 / GPT 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) ACES
10g/25g/100g Amresco 0285
HK-2 人腎近曲小管上皮細胞胃蛋白酶(豬胃粘膜)shēng huà shì jì容量:25克
CM-R027大鼠食管上皮細胞完全培養基100mLL-谷酸單鈉鹽 L-Glutamic acid
mono salt hydrat... 6106-4-3 100G 通用試劑
HuH-7人肝癌細胞克氏雙糖鐵瓊脂 Kliglqr Iron cgcr
EB病毒轉化的人B細胞;KMY1008 人神經少突起前質膠質細胞完全培養基 100mL過shēng huà shì jì容量:5克
人絨毛膜間充質基質細胞HCMSC9
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三乙酯(TEP)(Standard
for GC,>99.7%(GC))質量規格:Standard for GC,>99.7%(GC)Triethyl phosphate
人肺泡上皮細胞裂解物HPAEpiCL十三烷(Standard for
GC,>99%(GC))質量規格:Standard for GC,>99%(GC)Tridecane
鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu 胰腺癌細胞,PANC-1細胞 3T3 clone A31細胞,小鼠胚胎成纖維細胞十四醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC))質量規格:Standard for GC, ≥99.5%
(GC)1-Tetradecanol
人正常前列腺基質永生化細胞;WPMY-1十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))質量規格:standard for GC,≥99.5%(GC)Undecane
IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,1-環己基二乙酸質量規格:>98%,BRCDA,
1,1-Cyclohexanediacetic acid
人泛素蛋白(Ub) ELISA試劑盒操作方法試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。