產品名稱: 人Agouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒操作方法
英文名稱:Human Agouti Related Protein, AGRP Elisa Kit
產品貨號:XG-H63997
規格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..
人Agouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Human Agouti Related Protein, AGRP Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。 48T/96T。
流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
操作步驟:
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,依次進行稀釋數倍。
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標板底無水滴及孔內無氣泡后,立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
12、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人顱骨造骨細胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E,大鼠腎細胞 Rattus芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)Fmoc chloride質量規格:用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5氟羅里硅土(農殘級)Florisil®質量規格:農殘級
人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)Magnesium
silicate adsorbent(Synthetic)質量規格:250-125um
Ⅱ型肺泡上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)吡氟禾草靈標準溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl
solution質量規格:0.101mg/ml
人髓母細胞瘤細胞;D341Med 大鼠內膜上皮細胞完全培養基 100mL惡唑酮菌(標準品) Famoxadone
solution質量規格:分析標準品,98.5%
人腸微血管內皮細胞(HIMEC)( 5×105 ) RSC, 大鼠雪旺細胞 RattusL-谷氨酰胺質量規格:>99%,BRL-Glutamine
單核細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)羅氟司特質量規格:含量≥99.0%(HPLC)Roflumilast
TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照) 左乙拉西坦質量規格:>99%,BR,USPLevetiracetam
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16左乙拉西坦(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Levetiracetam
H293T細胞,人類胚胎腎臟表皮細胞 貓腎細胞,CRFK細胞 CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸林可霉素質量規格:>850mcg/mg,BRLincomycin
HCl
人上皮細胞完全培養基 100mL表告依春(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Epigoitrin
TE671 subline No.2細胞,人橫紋肌肉瘤細胞 化膿性鏈球菌 轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1表沒食子兒茶素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品(?)-Epigallocatechin/EGC
CCL4 Protein Human 重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標簽)表小檗堿(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Epiberberine
LS-17
IGFBP5 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 人細胞裂解液 (陽性對照) 間甲基紅質量規格:指示劑m-Methyl red
人脂肪間充質干細胞HMSC-ad紫脲酸銨(IND)質量規格:INDMurexide
SK-MES-1細胞,人肺癌細胞 人膀胱鱗癌細胞,ScaBER細胞 人前脂肪細胞-皮下HPA-s卡立普多質量規格:>99%,USP,BRCarisoprodol
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)卡立普多(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Carisoprodol
MICB Others Human 人 MICB 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡維地洛質量規格:>
99%,EPCarvedilol
人Agouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒操作方法檢測程序:公司產品僅用于科研,
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。