試劑配制:
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody
Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Human cartilage
oligomeric protein, COMP Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。 48T/96T。
產品名稱
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人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒操作方法
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英文名稱
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Human cartilage
oligomeric protein, COMP Elisa Kit
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貨號
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XG-H64006
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公司產品僅用于科研優勢特點:
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩定的重復性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養液、尿液、唾液等等多種標本類型;
5.節省實驗經費。
樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項:
1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正?,F象,微加熱至40℃使結晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室**防護條列執行。
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087蕓香柚皮苷(標準品)Narirutin質量規格:HPLC≥98%,標準品
CXCL16 Others Mouse 小鼠 CXCL16 / SRPSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) 澤瀉醇B醋酸酯(標準品)Alisol B
23-acetate質量規格:HPLC≥98%,標準品
豬胚胎傳代細胞;ST獐牙菜苷(標準品)Sweroside質量規格:HPLC≥98%,標準品
SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細胞裂解液 (陽性對照) 獐牙菜苦苷(標準品)Swertiamarin質量規格:HPLC≥98%,標準品
Huh-7 人肝癌細胞樟腦(標準品)Camphor質量規格:HPLC≥96%,標準品
REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 6,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin質量規格:>98.0%(HPLC)(N)
羅猴胎腎細胞;MA1044-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0
%(GC))4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin質量規格: >99.0 %(GC)
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))7-Methoxycoumarin-3-carboxylic
Acid質量規格:>98.0%(GC)(T)
CL-0229T84(人結腸腺癌肺轉移細胞)5×106cells/瓶×2溶劑綠 7(>85.0%(E))Pyranin質量規格:>85.0%(E)
SH-77細胞,小細胞肺癌 人T細胞白血病細胞,T-CEM細胞 人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))Sulfonfluorescein質量規格:>75.0%(HPLC)(T)
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1品紅,英文名或英文縮寫:Carbol fuchsin,級別:FMP,84%,規格:1克
SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) R(-)N(3,5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-
CM-H030人外周血白細胞完全培養基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM
10767-8-
MG-63
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic
hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標簽)炔雌醇3-醋酸鹽質量規格:美國進口Ethynyl Estradiol
3-Acetate
人成纖維細胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 Mouseβ-雌二醇 3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽質量規格:美國進口β-Estradiol 3-(β-D-glucuronide) salt
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F32-羥基炔雌醇質量規格:美國進口2-Hydroxy Ethynyl Estradiol
人視網膜內皮細胞 (HREC)( 5×105 )4-羥基炔雌醇質量規格:美國進口4-Hydroxy Ethynyl Estradiol
CM-M059小鼠膀胱平滑肌細胞完全培養基100mL炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Ethynyl Estradiol
3-β-D-Glucuronide
人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒操作方法試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。