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產品名稱:丙酮酸激酶(PK)比色法檢測試劑盒100管/96樣
規格 : 100管/96樣
測試方法:微量法
商品介紹:
測定意義
PK(EC 2.7.1.40)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化糖酵解過程中的后一步反應,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,也是產生ATP的關鍵酶之一,因此測定PK活性具有重要意義。
測定原理
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP**ATP和丙酮酸,乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸**乳酸和NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PK活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
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特點:
1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
丹酚酸F英文名稱: CDA, 1,1-Cyclohexanediacetic acidFAM59B蛋白抗體包裝5g
丹皮酚(標準品)英文名稱: Cellulose acetateFAM59A蛋白抗體包裝1g
丹皮酚新苷英文名稱: Cerium(III) acetate hydrateFAM160B1蛋白抗體包裝100g
丹皮酚原苷;牡丹酚原甙(標準品)英文名稱: Cerium(IV) sulfate tetrahydrateFAM161B蛋白抗體包裝25g
丹葉大黃素英文名稱: Cesium carbonateFAM151A蛋白抗體包裝1g
丹葉大黃素-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: Chicago sky blue 6B跨膜蛋白29抗體包裝25g
丹芝B(標準品)英文名稱: Chloramine T, trihydrateFAM154A蛋白抗體包裝5g
單白前苷B英文名稱: Chlorazol black EFAM155A蛋白抗體包裝1g
膽固(標準品)英文名稱: Chloroauric acid, hydrateFAM164B蛋白抗體包裝5g
膽紅素(標準品)英文名稱: Cholesteryl acetateFRMD3蛋白抗體包裝1g
膽木(標準品)英文名稱: Cholesteryl stearateFRMD4B蛋白抗體包裝25g
膽酸(標準品)英文名稱: Choline bitartrateFRMD7蛋白抗體包裝5g
淡豆豉(標準品)英文名稱: Chromium granularFRMD4A蛋白抗體包裝1g
蛋黃磷脂酰膽堿英文名稱: Chromium powder延胡索酰乙酰乙酸解酶抗體包裝1g
當歸(標準品)英文名稱: Chromium(III) chloride, hexahydrateFAM101A蛋白抗體包裝25g
涅斯特連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質量規格:>98%,BR神經絲蛋白M試劑盒七葉膽苷XVII ;Gypenoside
嗜鞣管囊酵母Pachysolen│tannophilus 質量規格:>98%,分析標準品神經絲蛋白L試劑盒青霉素酶; Penicillinase
: HBUM74223資源名稱: 鏈霉菌 質量規格:>98%神經絲蛋白H試劑盒七葉皂苷A;Aescin IA
丙酮酸激酶(PK)比色法檢測試劑盒100管/96樣Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase, CIAP 2.4-二羥基-6-甲基-煙酸乙酯Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
associated protein A, SP-A 恩拉霉素,持久素Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
associated protein A, SP-A (+)-兒茶素水合物Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat Clara cell protein, CC16 (+)-兒茶素水合物(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat Clara cell protein, CC16 (+)-兒茶素(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat Epinephrine/Adrenaline, EPI 維生素B6,鹽酸吡哆醇Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat Epinephrine/Adrenaline, EPI 維生素B6(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG, MPO-ANCA IgG 非達霉素Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG, MPO-ANCA IgG 比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat Complement 3, C3 比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat Complement 3, C3 石杉堿甲Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat Azidothymidine, AZT 表沒食子兒茶素Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat Azidothymidine, AZT 表兒茶素沒食子酸酯Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat dopamine, DA 萊苞迪甙ARat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
Rat dopamine, DA 萊苞迪甙A(標準品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:96T
Rat ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH 環亮氨酸甲酯鹽酸鹽Rat/大鼠Elisa試劑盒規格:48T
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。