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NAD激酶(NADK)比色法檢測試劑盒50管/24樣

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  • 產品名稱:NAD激酶(NADK)比色法檢測試劑盒50管/24樣
  • 產品型號:XG0181116-50管/24樣
  • 產品展商:西格
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簡單介紹

NAD激酶(NADK)比色法檢測試劑盒50管/24樣測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養細胞以及細胞培養上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。

產品描述

商品介紹:

測定意義

NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化**NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進行磷酸化反應,**NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理

NADK催化NAD+磷酸化,**NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

產品屬性:

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

NAD激酶(NADK)比色法檢測試劑盒50管/24樣

50管/24樣

可見分光光度法

XG0181116-50管/24樣

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。


注意事項:

①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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