實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
產品名稱
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規格
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貨號
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PCR檢測試劑盒
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盒
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XG-0113428
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常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
特點:
1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
生化試劑的技術分類:
1. 生化分離與分析技術
光譜技術已從單一的比色法發展為采用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發射光譜法、分子熒光光譜法。分離技術除了一般的離心和超離心技術外,還有層析技術和電泳技術。層析技術包括薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜(HPLC)等等。電泳技術中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的應用已明顯減少,瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAG)應用增多,目前已有自動電泳儀。
2. 自動分析與酶法分析
近年來我國引進了自動生化分析儀用以監測酶活性,分析的酶范圍擴大,測定準確度和精密度提高;同時自動化分析促進了酶法對代謝物測定的研究與應用,許多體內的生化反應被模擬,過去采用強堿、強酸、火焰等比較激烈的化學反應被逐漸取代。離子選擇電極的應用日益增多,并作為模塊組合參與自動化分析。
3.化學分析
隨著單克隆抗體制備技術的廣泛應用,濁度法、熒光、發光等自動化檢測技術迅速發展,臨床化學、學學科與技術之間的交叉和相互滲透,使越來越多的臨床化學檢驗采用了學技術,如apoA I,apoB等載脂蛋白的測定,脂蛋白(a)測定、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)質量測定等等。
4. 分子生物學技術
在除了對蛋白質、代謝物等分子水平的研究外,采用分子生物學技術進行基因診斷,正趨向于成熟。
胰腺癌細胞;PANC-1甲咪唑煙酸(標準品)質量規格:分析標準品 Imazapic
KLK7 Others Human KLK7
/ PRSS6 細胞裂解液 (陽性對照) 異標準溶液(10μg/ml,u=6%)質量規格:10μg/ml,u=6%Iprobenfos
standard solution
CM-H061腎小球內皮細胞完全培養基100mL氘代鹽酸(5g )質量規格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride
CD177 Others Human
CD177 / PRV-1 / PRV1 細胞裂解液 (陽性對照) 氘代鹽酸(5g )質量規格:D, 99.5% DCL 35% IN D2ODeuterium Chloride
內皮細胞HDLEC氘代鹽酸(10g)質量規格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O Deuterium Chloride
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium
DXF, M2-巨噬細胞**培養基DXF 250ml雙嘧達莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Dipyridamole
Di-O-β-D-glucuronide
主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA雙嘧達莫-D20 (主要的)質量規格:美國進口Dipyridamole-D20
(Major)
IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Dipyridamole
Mono-O-β-D-glucuronide
皮下脂肪細胞完全培養基 100mL酮基他米巴羅汀質量規格:美國進口Keto Tamibarotene
C2C12細胞,鼠肌原細胞 H08910(卵巢癌細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1ent-伏立康唑質量規格:美國進口ent-Voriconazole
噬菌粒 pcomb3HTTul(10ng)/支Fluoronaphthalene3218
pcomb3 HTT 展示系統Fluorocytosine225
pcomb3 lambda展示系統Flumethasone21357氟米松
噬菌粒 pcomb3 lambdaFlumequine428355氟甲喹
pJF3H cDNA展示系統Flumequine 428358氟甲喹鈉
人Bcl-2相關X蛋白(BAX)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:BCL2L4 Human
BAX(Bcl-2 Associated X Protein) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組BAX濃度
人饑餓素(GHRL)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:GHRL, MTLRP,
Ghrelin Human GHRL(Ghrelin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其他相關生物液體中天然及部分重組GHRL濃度。
試劑使用須知:本產品僅供科研研究使用
PCR檢測試劑盒(1)請參照相關法規、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行**操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業技術人員。必須在專業人士的指導監督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的**對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。