培養方法:
收到后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況:
如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,留10ml培養液繼續培養。
如果細胞已長滿(達80-90%)。即可進行傳代,具體步驟如下:
a,棄去培養液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶內加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培養液,輕輕吹打細胞。
c,加入等量的的培養液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養
d,傳代比例:1:2-1:3
產品名稱
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GB-1細胞價格
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規格
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T25
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貨號
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XG-X0106763
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產品詳細 腦膠質母細胞瘤
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 Dulbecco's modified
Eagle's medium with 10% fetal calf serum
傳代方法 1:2傳代
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
公司來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。本產品僅能用于科研
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線。
小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISAKit
ELISA. 96T/48T Chlorpheniramine maleate 中文名:馬來酸氯苯那敏 分子式:C20H23ClN2O4
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit
ELISA. 96T/48T Tetrahydrolachnophyllum
lactone 56407-87-5 中文名: 分子式:C10H14O2
小鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Daturametelin
I 904667-65-8 中文名: 分子式:C34H48O10 度:93.0% 關鍵詞: 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
小鼠高靈敏度促甲狀腺elisa試劑盒 小鼠高靈敏度促甲狀腺試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠高靈敏度促甲狀腺試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠高靈敏度促甲狀腺試劑盒、小鼠高靈敏度促甲狀腺eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Chimaphilin
482-70-2 中文名:梅笠草素 分子式:C12H10O2
小鼠高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Daturametelin
I 904667-65-8 中文名: 分子式:C34H48O10
霉酚酸 標準品 5-Methyl-5-phenyl-2,4-imidazolidinedione 24280-93-1 純品型,10mg
腈菌唑(Myclobutanil) 標準品 Myclobutanil 88671-89-0 純品型,0.1g
酮麝香 標準品 alpha-Methylstyrene 81-14-1 純品型,0.1g
順-10-五癸酸甲酯 標準品 1-Naphthoxyaceticacid 90176-52-6 純品型,10mg
2-十五烷酮 標準品 Orthosulfamuron
2345-28-0 純品型,100MG
1-十五醇 標準品 Oroticacid
629-76-5 純品型,0.25G
豬弓形蟲抗體ELISA檢測試劑盒1921-Actamido,5-dimethyladmantane199827
豬流感抗體ELISA檢測試劑盒192Memantine 4102鹽酸美金剛胺
豬附紅細胞體病ELISA檢測試劑盒96Valdecoxib1816952帕瑞考昔
豬囊尾蚴?。?span>CYT