實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。
產品名稱
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規格
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貨號
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Anti-phospho-NF1(Ser2515)抗體
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0.1ml/100μg
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XG-01K85246
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英文名稱 Anti-phospho-NF1(Ser2515)
中文名稱 磷酸化1型神經纖維瘤抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 細胞生物 學 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 147/319kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human NF1 around the phosphorylation site of Ser2515
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 NF1(phospho S2515); p-NF1(S2515); DKFZp686J1293; FLJ21220; Neurofibromatosis Noonan syndrome; Neurofibromatosis related protein NF 1; Neurofibromatosis related protein NF1; neurofibromatosis type I; Neurofibromatosis-related protein NF-1; Neurofibromin 1; Neurofibromin truncated; Neurofibromin1; NF 1; NF; NF1; NF1_HUMAN; NFNS; Type 1 Neurofibromatosis; von Recklinghausen disease neurofibromin; von Recklinghausen disease related protein VRNF; VRNF; WATS; Watson disease related protein WSS; Watson syndrome; WSS.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
AARI 25U (2U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
AARI 125U (2U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
LWEI (SFANI) 100U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
LWEI (SFANI) 500U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
OLII (ALEI) 200U (10U/ul) 限制性內切酶和克隆酶
洋川芎內酯I HPLC≥98% 50mg 組蛋白H4-K12乙?;瘷z測試劑盒10/20等
洋地黃毒苷 HPLC≥96% 20mg MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氧代川南亭堿 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)ELISA試劑盒 ,英文名: IGFBP4 ELISA Kit
氧海粟堿 HPLC≥98% 10mg 兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA檢測試劑盒rabbitSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 96T/48T
氧化白藜蘆醇 HPLC≥98% 20mg 犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)試劑盒 Canine heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA Kit
氧化槐定堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanICAM-2/sCD102ELISAKit人細胞間粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)規格:96T/48T
氧化槐果堿 HPLC≥98% 20mg 大量蛋白樣品液相法去內試劑盒5
氧化苦參堿 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氧化前胡素 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒
氧化芍藥苷 HPLC≥98% 20mg Rat monocyte chemotactic protein 2 (MCP-2/CCL8) ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒
喹禾靈,10ml 標準品 Quizalofop-ethyl 10ng/ul,10ML 特征形態 液態
精喹禾靈(自由酸) 標準品 Dibenzo(a,c)anthracene 10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態 液態
Quinoxyfen,10ng/ul 標準品 1-Tetracosanol 10ng/ul于環己烷,10ml 特征形態 液態
Anti-phospho-NF1(Ser2515)抗體完全線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20次
活體組織線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 10次
**/酵母細胞線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20次
冰凍切片線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒 20次
純化線粒體內膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒 100次