抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
產品名稱
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規格
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貨號
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Anti-NIRF抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K85310
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英文名稱 Anti-NIRF
中文名稱 環指蛋白107抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 鋅指蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 90kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from hu NIRF/RNF107
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 E3 ubiquitin-protein ligase UHRF2; Np95 like RING finger protein; Np95-like ring finger protein; Np95/ICBP90 like RING finger protein; Np95/ICBP90-like RING finger protein; Nuclear protein 97; Nuclear zinc finger protein Np97; RING finger protein 107; RNF 107; RP11-472F14.2; Ubiquitin like containing PHD and RING finger domains protein 2; Ubiquitin-like PHD and RING finger domain-containing protein 2; Ubiquitin-like-containing PHD and RING finger domains protein 2; Uhrf2; UHRF2_HUMAN.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 0.5mg
HHV8 ORF50 英文名稱: 人類皰疹病毒8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh BNP 腦素/利肽抗體 規格 0.2ml
Anti-CSF3/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體 規格 0.2ml
Anti-Nrf2/FITC 熒光素標記核因子2相關因子2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA) 標準品 3-Methyl-quinoxaline-2-carboxylicacid 74003-63-7 純品型,10mg 特征形態 固態
8-甲基吡啶并[2,3-d]吡嗪-5(6h)-酮 標準品 epsilon-Caprolactam 90004-07-2 純品型,10mg 特征形態 固態
Methylprednisolone acetate Methylprednisoloneacetate - 純品型,25mg 特征形態 固態
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr969) 英文名稱: 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml
細胞角蛋白16抗體 Anti-CK16 0.1ml
Anti-Oxytetracycline/FITC 熒光素標記土霉素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PIWIL3 piwi樣3蛋白抗體 規格 0.1ml
Mouse Anti-ra
Anti-NIRF抗體全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒 10次
冰凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒 50次
石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位間接染色試劑盒 10次
石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位直接染色試劑盒 50次
細胞衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒 50次
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。