實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。
產品名稱
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規格
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貨號
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Anti-PTGEs抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K86315
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英文名稱 Anti-PTGEs
中文名稱 前列腺素E合成酶抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Guinea Pig
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 學 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 合成與降解
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PTGEs N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Glutathione S transferase 1 like 1; MGC10317; MGST IV; MGST1 L1; MGST1 like 1; MGST1-L1; MGST1L1; MGSTIV; Microsomal glutathione S transferase 1 like 1; Microsomal glutathione S-transferase 1-like 1; Microsomal prostaglandin E synthase 1; Microsomal prostaglandin E synthase 1; mPGES 1; MPGES; mPGES-1; p53 induced apoptosis protein 12; p53 induced gene 12; p53 induced gene 12 protein; p53-induced gene 12 protein; PGES; PIG 12; PIG12; PP 102; PP 1294; PP102; PP1294; Prostaglandin E synthase; PTGES; PTGES_HUMAN; TP53I12; Tumor protein p53 inducible protein 12.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
Peptide YY (human) PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine, porcine, rat Pneumadin (rat) Procathepsin B (26-50) (rat) pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)
(Leu31,Pro34)-Peptide YY(human) PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat) (Tyr5?12,Lys7)- Polyphemusin II, T22 Procathepsin B (36-50)(rat) (Cys8)-pTH (1-8) (human)
(Pro34)-Peptide YY(human) Acetyl-PACAP-38 (human,mouse, ovine, porcine, rat) Polyphemusin II-Derived Peptide, T140 Procollagen Type I (212-216) pTH (1-31) (human)
RRLIEDNEYTARG QRRQRKSRRTI Peptide ε SAMS Peptide pTH (1-31) amide (human)
RGYALG GRGLSLSR FARKGALRQ Syntide 2, Calmodulin-Dependent Protein Kinase Substrate (Cyclo(Glu22-Lys26),Leu27)-pTH (1-31)amide (human)
異阿魏酸乙酯 HPLC≥95% 20mg 小鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3A(W3A)ELISA試劑盒 ,英文名: W3A ELISA Kit
乙酰甲基二氫兩面針堿 HPLC≥95% 20mg 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測試劑盒Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T
蛇葡萄素F HPLC≥95% 20mg 牛腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)試劑盒 Bovine Adenovirus 3(ADV3)aibody IgG ELISA kit
苦參醇W HPLC≥95% 20mg 英文名稱humanAbELISAKIT人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKIT規格:96T/48T
苦參醇M HPLC≥95% 20mg 地生蘭(terresial)增殖培養基500毫升溶液/片劑
苦參醇B HPLC≥95% 20mg Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鶴慶五味子辛素 HPLC≥95% 20mg 小鼠無翅型MMTV整合位點家族成員10B(W10B)ELISA試劑盒 ,英文名: W10B ELISA Kit
黨參炔醇 HPLC≥95% 20mg 兔子B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA檢測試劑盒RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T
黃芩素 O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 牛纖維蛋白原(Fb)試劑盒 Bovine Fibrinogen,Fb Elisa Kit
甲氧基鐵屎米酮 HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
丁苯咪唑(帕苯咪唑) 標準品 2,3,4,5,6-Pentabromoethylbenzene 14255-87-9 純品型,25mg 特征形態 固態
Parathion-methyl D6標準品 Pentachloroanisole - 純品型,25mg 特征形態 固態
Para Red D6 (naphthyl D6),certifi Siduron - 純品型,10mg 特征形態 固態
Anti-PTGEs抗體血清/血漿總膽汁酸酶循環比色法定量檢測試劑盒 20次
組織總膽汁酸酶循環比色法定量檢測試劑盒 20次
體液總膽汁酸酶循環比色法定量檢測試劑盒 20次
組織腎素(renin)活性熒光定量檢測試劑盒 20次
血液腎素(renin)熒光定量檢測試劑盒 20次