實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。
產品名稱
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規格
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貨號
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Anti-RING2/RNF2抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K86450
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英文名稱 Anti-RING2/RNF2
中文名稱 環指蛋白2抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RING2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
別 名 BAP 1; BAP1; DING; DinG protein; E3 ubiquitin protein ligase RING 2; E3 ubiquitin protein ligase RING2; E3 ubiquitin-protein ligase RING2; HIP2 interacting protein 3; HIP2-interacting protein 3; HIPI 3; HIPI3; Huntingtin interacting protein 2 interacting protein 3; Huntingtin-interacting protein 2-interacting protein 3; Polycomb M33 interacting protein Ring 1B; Polycomb M33 interacting protein Ring1B; Protein DinG; RING 1B; RING 2; Ring finger protein 1b; Ring finger protein 2; RING finger protein BAP 1; RING finger protein BAP-1; RING finger protein BAP1; RING1b; RING2_HUMAN; RNF 2; RNF2.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗IgM 0.1ml
GGN 英文名稱: 配子**素抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Activated protein C/PROC1 活化蛋白C抗體 規格 0.1ml
Anti-MCM3/FITC 熒光素標記染色體維持缺陷蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗IgG 規格 0.1ml
anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標記視黃酸受體應答蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人膠質細胞源性連接蛋白(GDN)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:SERPINE2 , GDN, GDNPF, PI-7, PI7, PN-1, PN1, PNI Human GDN(Glia Derived Nexin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組GDN濃度
AP180 英文名稱: 裝配銜接蛋白180抗體 0.2ml
EGR3 英文名稱: 早期生長反應蛋白3抗體 0.1ml
抗甲狀腺過氧化物酶抗體 Anti-TPO 0.1ml
Anti-TPO/FITC 熒光素標記兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1530) 0酸化整合素β4抗體 規格 0.1ml
PP-2B alpha 1 蛋酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原)Multi-clas
Anti-RING2/RNF2抗體淀粉瓊脂平板 50個
丁酸甘油脂瓊脂平板 50個
牛奶石蕾瓊脂平板 50個
明膠瓊脂平板 50個
尿素瓊脂平板 50個