抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
產品名稱
|
規格
|
貨號
|
Anti-phospho-RAD51(Tyr315)抗體
|
0.1ml/100μg
|
XG-01K86770
|
英文名稱 Anti-phospho-RAD51(Tyr315)
中文名稱 磷酸化Rad51抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 學 信號轉導 轉錄調節因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human RAD51 around the phosphorylation site of Tyr315
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 RAD51(phospho Y315); BRCA1/BRCA2 containing complex, subunit 5; BRCC 5; BRCC5; DNA repair protein RAD51 homolog 1; DNA repair protein rhp51; E coli RecA homolog; HGNC:9817; Homolog of E coli RecA; homolog of S cerevisiae RAD51; HRAD51; HsRad51; HsT16930; Rad 51; RAD51 homolog (RecA homolog, E. coli) (S. cerevisiae); RAD51 homolog; RAD51 homolog S. cerevisiae; RAD51 S cerevisiae homolog; RAD51A; RECA; RecA homolog E. coli; RecA like protein; RecA, E. coli, homolog of; recombination protein A.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC 羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GANP 英文名稱: 中心相關核蛋白MCM3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANP32C 致瘤0蛋白32相關蛋白1抗體 規格 0.2ml
Anti-IL-22R/IL22RA1/FITC 熒光素標記白介素-22受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗人IgG 規格 0.3ml
Anti-Resistin/FITC 熒光素標記抵抗素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人晶狀體蛋白αB(CRYαB)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:CRYAB, CMD1II, CRYA2, CTPP2, HSPB5 Human CRYαB(Crystallin Alpha B) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CRYαB濃度
Slc22a5 英文名稱: 溶質載體家族蛋白22成員5抗體 0.2ml
FDC-SP 英文名稱: 濾泡樹突細胞分泌蛋白抗體 0.1ml
錯配修復蛋白2抗體 Anti-MSH-2 0.1ml
Anti-Secretin receptor/FITC 熒光素標記分泌素受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PBK/TOPK(Thr9) 0酸化PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶抗體 規格 0.1ml
ACEI (An
Anti-phospho-RAD51(Tyr315)抗體通用型辣椒輕斑駁病毒(Pepper Mild Mottle Virus;PMMV) 20次
基因檢測試劑盒
通用型洋李痘皰病毒(Plum Pox Virus;PPV)基因檢測試劑盒 20次
通用型馬鈴薯卷葉病毒(Potato Leafroll Virus;PLRV) 20次
基因檢測試劑
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。