抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人β(LTβ)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:LTB, TNFC, TNFSF3, p33, Lymphotoxin beta, TNLG1C, LT-beta, Tumor necrosis factor C, TNF-C, Tumor necrosis factor ligand superfamily member 3 Human LTβ(Lymphotoxin Beta) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組LTβ濃度
產品名稱
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規格
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貨號
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Anti-TNFAIP3/A20西格抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K87052
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英文名稱 Anti-TNFAIP3/A20
中文名稱 腫瘤壞死因子α誘導蛋白3抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 信號轉導 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 90kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TNFAIP3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 TNFA1P2; TNFAIP 3; Tnfip 3; Tnfip3; Tumor necrosis factor alpha induced protein 3; Tumor necrosis factor induced protein 3; Tumor necrosis factor inducible protein A20; Zinc finger protein A20; A20; MGC104522; MGC138687; MGC138688; OTU domain containing protein 7C; OTUD7C; Putative DNA binding protein A20.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。
實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
歐前胡素(標準品) Imperatorin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 PorcineHistamine,HISELISA試劑盒豬組胺(HIS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
α-蒎烯 α-pinene 質量規格:GC≥97%,標準品 小鼠歸巢關聯細胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒 ,英文名: HCAM ELISA Kit
β-蒎烯(標準品) β-pinene 質量規格:HPLC≥99%,標準品 人神經氨酸酶(NA)ELISA檢測試劑盒Humanneuraminidase,NAELISAKit 96T/48T
七葉膽苷XVII(標準品) Gypenoside XVII 質量規格:HPLC≥98%,標準品 大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit
七葉皂苷鈉(標準品) Aescinate 質量規格:HPLC≥98%,標準品 英文名稱RatAquaporin1ELISAKit大鼠水通道蛋白1(AQP1)ELISAKit規格:96T/48T
漆黃素 Fisetin 質量規格:HPLC≥95%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20
漆黃素(標準品) Fisetin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 ELISAKitVPI人血管活性肽酶抑制劑規格:48T/96T
奇任醇(標準品) Kirenol 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 ,英文名: Cys-C ELISA Kit
千層紙素A(標準品) Oroxylin A 質量規格:HPLC≥98%,標準品 大鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒Ratglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T
千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯(標準品) 5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol 質量規格:HPLC≥98%,標準品 人表試劑盒 Human Epitestosterone ELISA Kit
4-Methylphenol,10ng/ul 標準品 Octachlorostyrene 10ng/ul于甲醇,10ml 特征形態 液態
Methyl N-(3-hydroxyphenyl)-carbamate,10ng 4-Nonylphenol-ethoxylate(mono-,di-,tri-)(technical) 10ng/ul于環己烷,10ML 特征形態 液態
4,4?Methylene-bis(2-chloroaniline),10n 4,4′-Methylene-bis(2-chlor
Anti-TNFAIP3/A20西格抗體4-Chlorotestosterone acetate 855-19-6 中文名:醋酸氯 分子式:C21H29ClO3 人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISAKit
Estra-4,9-diene-3,17-dione 5173-46-6 中文名:甲基雙烯雙酮 分子式:C18H22O2 人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISAKit
Methoxydienone 2322-77-2 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。