產(chǎn)品名稱(chēng):多聚賴(lài)氨酸溶液
規格:50ml
貨號:XG-RY2114
儲存條件:—20℃,避光,12個(gè)月
用途:一種粘附劑,常用于載玻片的包被
注意事項:
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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多聚賴(lài)氨酸溶液50ml
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50ml
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XG-RY2114
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
Peptide Standard 1Cys-Pro-Asp-Phe-Gly-His-Ile-Ala-Met-Glu-Leu-Ser-Val-Arg-Thr-Trp-Lys-Tyr
Peptide TAla-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr
Peptide YY (13-36) (canine, mouse, porcine, rat)Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Ser-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
Peptide YY (3-36) (canine, mouse, porcine, rat)Ala-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Ser-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
Peptide YY (canine, mouse, porcine, rat)Tyr-Pro-Ala-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Ser-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
Peptide YY(3-36), PYY, humanIle-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
Peptide YY, HumanTyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
PGC-1α (205–216), Proliferator-activated Receptor Coactivator-1 α (205–216)Ac-Arg-Pro-Cys-Ser-Glu-Leu-Leu-Lys-Tyr-Leu-Thr-Thr-NH2
PGLaGly-Met-Ala-Ser-Lys-Ala-Gly-Ala-Ile-Ala-Gly-Lys-Ile-Ala-Lys-Val-Ala-Leu-Lys-Ala-Leu-NH2
Phenylalanine-free protein 115 120 125Gln-Gln-Lys-Glu-Pro-Met-Ile-Gly-Val-Asn-Gln-Glu-Leu-Ala-Tyr-Phe
PHI, porcineHis-Ala-Asp-Gly-Val-Phe-Thr-Ser-Asp-Phe-Ser-Arg-Leu-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Glu-Ser-Leu-Ile-NH2
Anti-UCP-1/FITC 熒光素標記線(xiàn)粒體脫偶連蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細胞表面趨化因子受體4抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
組織蛋白酶D抗體 Anti-cath-D/CD/Cathepsin D 0.1ml
Synaptojanin 2 英文名稱(chēng): 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 0.2ml
Estrogen Receptor alpha 英文名稱(chēng): 雌受體α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基基輔酶A還原酶抗體 規格 0.1ml
CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細胞表面趨化因子受體4抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
human Rabies virus IgG/Biotin 人狂犬病球蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細胞間粘附分子-2抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
CD25/白介素2受體a鏈抗體 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml
SSB 英文名稱(chēng): 干燥癥SSB/La抗體 0.2ml
Ensconsin 英文名稱(chēng): 上皮細胞微管相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 規格 0.1ml
ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細胞間粘附分子-2抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
多聚賴(lài)氨酸溶液50ml癸酸鈉,英文名或英文縮寫(xiě):wo7ium decanoate,級別:USP級,規格:1克
1116-76-3三正辛胺Tri-n-octylamine
辛基-β-D-硫代葡萄糖苷,英文名或英文縮寫(xiě):Decyl-β-D-1-thioglucopyranoside,級別:生物技術(shù)級,95%,規格:1克
2,4-二苯 2,4-Difluoroiodobenzene,98% 2265-93-2 5G 通用試劑
聚乙二醇6000/聚氧6000/PEG6000 CP 500克 國產(chǎn)/
RAPDPrimerRAPD引物100克超純,75%
120-47-8尼泊金乙酯etxylparaben
L-本甘酸甲酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
反玉米素核苷 trans-Zeatin-riboside,95% 6025-53-2 10MG 通用試劑
雙酚AF Hqxcfluorobisphqnol c 1478-61-1
(R)-(-)-2-吡咯烷,英文名或英文縮寫(xiě):D-Prolinol,級別:BR,98%,規格:5克
16858-01-8三(2-甲基)胺tris(2-pyridylmetxyl)amine
metxyl 4-(4,4,5,5-tetrametxyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)thiopxene- 709648-80-6
對磺酸乙酯 Ethyl p-sulfonate,98% 80-40-0 25G 通用試劑
-2.3-二全(+4℃) ncphclqnq-2,3-DICcRBOXcLDqHYDq 7149-49-7