產(chǎn)品名稱(chēng):聚乙烯醇甘油封片劑
規格:5ml
貨號:XG-RY2155
儲存條件:4℃,避光,12個(gè)月
用途:又稱(chēng)抗熒光衰減封片劑,是一種用于減緩熒光淬滅的封片試劑。封片后可以-20度或4度保存,保存幾周后熒光強度才有所減弱,羅丹明熒光素在聚乙烯醇中溶解,因此不能用此封片劑。
注意事項:可以有效延長(cháng)組織切片的觀(guān)察和保存時(shí)間。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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聚乙烯醇甘油封片劑5ml
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5ml
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XG-RY2155
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
HBVpol655, HBV polymerase (655-663)Ala-Leu-Met-Pro-Leu-Tyr-Ala-Cys-Ile
HCV Core Protein (107-114)Trp-Gly-Pro-Asn-Asp-Pro-Arg-Arg
HCV Core Protein (19-25)Pro-Gln-Asp-Val-Lys-Phe-Pro
HCV Core Protein (59-68)Arg-Gly-Arg-Arg-Gln-Pro-Ile-Pro-Lys-Ala
HCV NS4A Protein (21-34) (JT strain)Gly-Ser-Val-Val-Ile-Val-Gly-Arg-Ile-Ile-Leu-Ser-Gly-Arg
HCV NS4A Protein (22-33) (FDA strain)Cys-Val-Val-Ile-Val-Gly-Arg-Ile-Val-Leu-Ser-Gly
HCV NS4A Protein (22-34) (H strain)Cys-Val-Val-Ile-Val-Gly-Arg-Val-Val-Leu-Ser-Gly-Lys
HCV Nucleoprotein (88-96)Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-Trp-Ala-Gly-Trp
HCV-1 e2 Protein (484-499)Pro-Tyr-Cys-Trp-His-Tyr-Pro-Pro-Lys-Pro-Cys-Gly-Ile-Val-Pro-Ala
HCV-1 e2 Protein (554-569)Trp-Met-Asn-Ser-Thr-Gly-Phe-Thr-Lys-Val-Cys-Gly-Ala-Pro-Pro-Cys
Head activatorPyr-Pro-Pro-Gly-Gly-Ser-Lys-Val-Ile-Leu-Phe
OTF2B(Human octamer transcription factor 2B) ELISA Kit 人八聚體轉錄因子Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-PD-1/CD279 程序性死亡1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HMGCR 三羥基基輔酶A還原酶抗體 規格 0.2ml
eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit 小鼠內皮型一氧化氮合成酶3 96T
CD162 英文名稱(chēng): P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.2ml
C1orf52 英文名稱(chēng): 1號染色體開(kāi)放閱讀框52抗體 0.2ml
Anti-PD-1/CD279 程序性死亡1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Anti-Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 熒光素標記整合素αV抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標記抗豬水腫病大腸桿志賀樣Ⅱ型突變體(O139株)抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMPK gamma 1 腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體 規格 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5 Cy5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOLPH3 英文名稱(chēng): 高爾基體外周膜蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗馬IgG 規格 0.1ml
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標記抗豬水腫病大腸桿志賀樣Ⅱ型突變體(O139株)抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
聚乙烯醇甘油封片劑5mlL-賴(lài)酸醋酸5克RT
629-59-4十四烷T(mén)ETRADECANE
metxYLEnepIS-ACRYLAMIDE甲叉雙丙烯酰胺蛋白組學(xué)級250G110-26-9RT
2,4-二 2,4-Difluoro,99% 452-76-6 1G 通用試劑
氫銨/重銨/酸性銨/2,3-二羥基-R-(R*,R*)-丁二酸單銨鹽/酸式銨//Ammonium bitartrate AR,98% 250克 國產(chǎn)/
RIBOREADYCOLORMICRORNALADDERMICRO RNA LADDER生物技術(shù)級透明藍色液體FROZENsigma
水蘇糖水合物 STcCHYOSq 2461-98-
6-Bromo-3-ethoxy-2-fluoropxenylboronic acid 871126-14-6
白當歸素 Byakangelicin (≥98%,HPLC) 19573-01-4 20MG 標準品
L-甲狀腺素鈉/(2S)-2-基-3-4-(4-羥基-3,5-二-苯氧基)-3,5-二苯基丙酸鈉/L-甲狀腺胺鈉/3,5,3′,5′-四甲狀腺-L-原酸鈉/甲狀腺素鈉/L-膩,3,5-四甲狀腺酸鈉/L-thyroxine sodium BR,97%,類(lèi) 1克 國產(chǎn)
鎢酸鉀500克
SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原裝
氫氧化鋇shēng huà shì jì容量:RT5克
隊肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8
葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量:2000u