公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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SDS-EDTA染料混合液5ml
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5ml
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XG-RY2376
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產(chǎn)品名稱(chēng):SDS-EDTA染料混合液
規格:5ml
貨號:XG-RY2376
儲存條件:4℃,12個(gè)月
用途:變性凝膠加樣緩沖液
注意事項:主要由SDS、EDTA、溴酚藍、二甲苯青FF、蔗糖等組成。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。

溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
玻璃酸酶英文名稱(chēng):Hyaluronidase規格:200 IU/支保存:-20℃,避光
可溶性淀粉英文名稱(chēng):Soluble starch規格:10g保存:-20℃,避光
酪蛋白英文名稱(chēng):Casein規格:7g/瓶保存:-20℃,避光
乳糖發(fā)酵培養基英文名稱(chēng):Lactose fermentation medium規格:3.0g /100mL,20袋/盒保存:-20℃,避光
四硫磺酸鈉亮綠對照培養基基礎英文名稱(chēng):Four sulfonic acid sodium light green contrast medium base規格:4.5g/100ml保存:-20℃,避光
溴化十六烷基胺瓊脂對照培養基英文名稱(chēng):Sixteen alkyl trimethyl amine bromide agar control medium規格:13.6g /300mL,20袋/盒保存:-20℃,避光
哥倫比亞瓊脂對照培養基英文名稱(chēng):The control Columbia agar culture medium規格:13.2g/300ml保存:-20℃,避光
綠膿素測定用對照培養基基礎英文名稱(chēng):Pyocyanin determined by contrast medium base規格:13.9g/300ml保存:-20℃,避光
顯色對照培養基英文名稱(chēng):Candida color contrast medium規格:4.8g/100ml保存:-20℃,避光
沙氏葡萄糖瓊脂對照培養基英文名稱(chēng):Sabouraud dextrose agar control medium規格:19.5g/300ml保存:-20℃,避光
沙門(mén)、志賀屬瓊脂對照培養基英文名稱(chēng):Salmonella, Shigella Agar control medium規格:18.0g/300ml保存:-20℃,避光
麥康凱瓊脂對照培養基英文名稱(chēng):Mark Kang Kai agar control medium規格:15.6g/100ml保存:-20℃,避光
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC 熒光素標記內脂素/內臟脂肪素(N端抗體)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18抗原(C端)Multi-class antibodies規格: 0.5ml
抗Jagged1/CD339抗體 Anti-CD339/Jagged1 0.1ml
SAMD7 英文名稱(chēng): SAMD7蛋白抗體 0.2ml
Epsin 2 英文名稱(chēng): 內吞作用輔助蛋白EPN2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GAB2(Ser623) 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 規格 0.1ml
CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18抗原(C端)Multi-class antibodies規格: 0.5ml
GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
MME CD10 / Neprilysin / MME 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser126) 磷酸化周期素B1抗體 規格 0.1ml
Western封閉液 100ml 自產(chǎn)
Zic1 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白201抗體 0.1ml
DUX4 英文名稱(chēng): 雙同源框蛋白4抗體 0.2ml
MME CD10 / Neprilysin / MME 鼠單抗 (PE) Human
SDS-EDTA染料混合液5mlPE標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-YTHDF2 Antibody升麻素苷80681-45-4
APC標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC6 Antibody(原貨號PB0524)羥基積雪草苷34540-22-2
Alexa Fluor 350標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-YBX1 Antibody鹽酸青藤堿6080-33-7
Alexa Fluor 488標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-XRCC6 Antibody甜菜堿107-43-7
Alexa Fluor 555標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-YAP1 Antibody冬凌草甲素28957-04-2
Alexa Fluor 647標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-YES1 Antibody綠原酸327-97-9
辣根過(guò)氧化物酶標記的兔抗長(cháng)爪沙鼠IgGAnti-YWHAE Antibody比克白芷醚26091-79-2
辣根過(guò)氧化物酶標記的兔抗水貂IgGAnti-ZAP70 Antibody吳茱萸堿518-17-2
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。