產(chǎn)品名稱(chēng):PAGE連續凝膠電泳緩沖液
規格:500ml
貨號:XG-RY2384
儲存條件:室溫,12個(gè)月
用途:非變性連續PAGE緩沖液
注意事項:主要由Tris、甘氨酸組成。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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PAGE連續凝膠電泳緩沖液500ml
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500ml
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XG-RY2384
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
Bradykinin [Hyp3]Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg
Bradykinin Potentiator BPyr-Gly-Leu-Pro-Pro-Arg-Pro-Lys-Ile-Pro-Pro
Bradykinin Potentiator B; Angiotensin I Converting Enzyme InhibitorPyr-Gly-Leu-Pro-Pro-Arg-Pro-Lys-Ile-Pro-Pro
Bradykinin Potentiator CpGlu-Gly-Leu-Pro-Pro-Gly-Pro-Pro-Ile-Pro-Pro-OH
Bradykinin Potentiator CPyr-Gly-Leu-Pro-Pro-Gly-Pro-Pro-Ile-Pro-Pro
Bradykinin-Like Neuropeptide (3-11) (Aplysia californica)Arg-Ser-Arg-Gly-Pro-Ser-Pro-Arg-Arg
Bradykinin-Like Neuropeptide (Aplysia californica)Met-Lys-Arg-Ser-Arg-Gly-Pro-Ser-Pro-Arg-Arg
Brain Derived Acidic Fibroblast Growth Factor (102-111); FGF acidic (102-111) (bovine brain)His-Ala-Glu-Lys-His-Trp-Phe-Val-Gly-Leu
Brain Derived Acidic Fibroblast Growth Factor (1-11); FGF acidic (1-11) (bovine brain)Phe-Asn-Leu-Pro-Leu-Gly-Asn-Tyr-Lys-Lys-Pro
Brain Derived Basic Fibroblast Growth Factor (1-24)Pro-Ala-Leu-Pro-Glu-Asp-Gly-Gly-Ser-Gly-Ala-Phe-Pro-Pro-Gly-His-Phe-Lys-Asp-Pro-Lys-Arg-Leu-Tyr
Brain Injury Derived Neurotrophic PeptideGlu-Ala-Leu-Glu-Leu-Ala-Arg-Gly-Ala-Ile-Phe-Gln-Ala-NH2
Anti-SPY /FITC 熒光素標記抗spindly抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
磷脂酸磷酸酶2C抗體 Anti-PAP2c 0.1ml
SIRT4 英文名稱(chēng): 沉默調節相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
ECP 英文名稱(chēng): 嗜酸性粒細胞陽(yáng)離子蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Thr435) 磷酸化細胞核因子抗體 規格 0.1ml
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-phospho-ERK1(pThr202/pTyr204)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原活化蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit Anti-FITC/Gold 金標記兔抗熒光素 (10nm/15nm)Multi-class antibodies規格: 2ml
纖維母細胞生長(cháng)因子受體1抗體 Anti-FGFR1 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE PE標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
FOXF2 英文名稱(chēng): 叉頭蛋白F2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser63) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 規格 0.1ml
Rabbit Anti-FITC/Gold 金標記兔抗熒光素 (10nm/15nm)Multi-class antibodies規格: 2ml
PAGE連續凝膠電泳緩沖液500mlPE標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR1 Antibody瓊脂糖凝膠4B蛋白A售后
PE-Cy3標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR2 AntibodyL-來(lái)蘇糖售后
PE-CY5標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR3 Antibody聚蔗糖100保存條件
APC標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR2 Antibody玉米淀粉實(shí)驗方法
Cy3標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR4 AntibodyL-谷氨酰操作步驟
Alexa Fluor 555標記的驢抗羊IgGAnti-ACOT1 Antibody小鼠雜交瘤株;2D4
PE-Cy7標記的驢抗羊IgGAnti-ACKR4 Antibody水合氧化前胡素Hydrous oxide ofthe former Hu Su
膠體金標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACOT12 Antibody苦蒿素Bitterartemisin