產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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包涵體分離緩沖液500ml
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500ml
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XG-RY2437
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產(chǎn)品名稱(chēng):包涵體分離緩沖液
規格:500ml
貨號:XG-RY2437
儲存條件:室溫,12個(gè)月
用途:蛋白質(zhì)分離,分離包涵體
注意事項:
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。

溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
補體成分4b(C4b)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 吉氏芽孢桿PAF1 (D9G9X) Rabbit mAb
補體C5轉化酶(C5c)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 謝瓦散囊Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb
補體片斷5b(C5b)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 耐輻射奇球Merlin (D3S3W) Rabbit mAb
神經(jīng)肽Y受體Y5(NPYR5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒瘤突曲霉hERG1a (D1Y2J) Rabbit mAb
伴刀豆球蛋白A(ConA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 球孢白僵SIX1 (D4A8K) Rabbit mAb
結締組織生長(cháng)因子(CTGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 紡錘雷素鏈霉SCAI (D9A7Y) Rabbit mAb
結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 香菇USP Antibody Sampler Kit
間隙連接蛋白26(CX26)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 宛氏擬青霉Merlin (D6N8H) Rabbit mAb
間隙連接蛋白31(CX31)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 抗生鏈霉ADAMTS1 (D5G4Z) Rabbit mAb
嗜鉻蛋白B(CHGB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蘇云金芽孢桿SimpleChIP® Human HSP90β Promoter Primers
嗜中性粒防御素α1(DEFα1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒林生毛霉Dab2 (D7O9T) Rabbit mAb
I型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 產(chǎn)氨短桿PathScan® Phospho-FGF Receptor 1 (panTyr) Sandwich ELISA Kit
I型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 伯克霍爾德氏IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)
II型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-II)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 堅強芽孢桿IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)
乳酸脫氫酶B(LDHB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枯草芽孢桿Phospho-IRAK4 (Thr345/Ser346) (D6D7) Rabbit mAb (PE Conjugate)
包涵體分離緩沖液500ml鈣/鈣調蛋白依賴(lài)蛋白激酶IG抗原Anti-CARM1 Antibody頭孢唑林雜質(zhì)ECefazolin?impurity E
轉移生長(cháng)因子–β1(抗原)Anti-CASP4 Antibody重組胰島素單體-二聚體Two?recombinant insulin?monomer?-?dimer
鈣/鈣調素依賴(lài)蛋白激酶2b抗原Anti-CASP5 Antibody氟尿苷Floxuridine
Park7/DJ-1/CAP1抗原Anti-CASP7 Antibody玻璃酸酶Hyaluronidase
環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原Anti-CASZ1 Antibody纖維蛋白原Fibrinogen
轉移生長(cháng)因子–β2前體肽Anti-CAVIN3 Antibody哥倫比亞瓊脂對照培養基The control?Columbia?agar?culture mediu
轉移生長(cháng)因子–β3(抗原)Anti-CASP9 Antibody豬磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIκBα)elisa檢測試劑盒
轉移生長(cháng)因子β受體2(多肽抗原)Anti-CBFA2T3 Antibody豬抗糖蛋白抗體(GP)elisa檢測試劑盒