特點(diǎn):
1、采用全進(jìn)口原料:高效、靈敏、特異,嚴格引進(jìn)國際技術(shù)標準進(jìn)行批量生產(chǎn)。
2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:重復性高,可靠性強,效果穩定。
3、購買(mǎi)本公司的溶液,提供免費代測技術(shù)服務(wù)的,有技術(shù)疑問(wèn)可以提供一對一的解答,存在質(zhì)量問(wèn)題可申請退換。
4、技術(shù)服務(wù):專(zhuān)業(yè),及時(shí),耐心。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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Triton-SDS細胞裂解液100ml
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規格
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100ml
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貨號
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XG-RY2447
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分類(lèi):蛋白提取
儲存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:裂解緩沖液
注意事項:主要由2%Triton X-100、氯化鈉、Tris-HCl、SDS組成,。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

標準物質(zhì)的管理:
(一)規范記錄:
建立標準物質(zhì)臺帳,定期更新臺賬,明確責任主體,以便做到可以追本溯源;
領(lǐng)用時(shí),記錄好領(lǐng)用時(shí)的名稱(chēng)、數量、時(shí)間、領(lǐng)用人、發(fā)放人等必要的信息;
標準物質(zhì)應在有效期內使用,應定期檢查標準物質(zhì)的有效期,對于超限的標準物質(zhì)要填寫(xiě)銷(xiāo)毀登記表;建立標準物質(zhì)檔案。
(二)定期核查:
對于標準物質(zhì)的種類(lèi)、級別、介質(zhì)、濃度含量、有效期、批號、環(huán)境條件、儲存方法、帳物相符等等各參數,要定期核查。
定期檢查實(shí)驗室各檢測項目所對應的標準物質(zhì)是否相符。對新增檢測項目所對應的標準物質(zhì)應及時(shí)納入規范管理。
存放環(huán)境條件和有效性。按標準物質(zhì)證書(shū)上規定的環(huán)境條件,儲存方法進(jìn)行存放,及時(shí)檢查是否過(guò)期。標準物質(zhì)的儲存環(huán)境應保證其特性完整不變。
標準物質(zhì)所用介質(zhì)和濃度是否滿(mǎn)足檢測方法對介質(zhì)的要求。濃度是否合適,所用的介質(zhì)對分析是否有影響。

注意事項:
a.盡量減少反復凍融的次數,以免失效。
b.基因轉染到細胞內要一段時(shí)間才能表達出蛋白質(zhì), 所以篩選不能太早。
c. 篩選也不宜太遲,一般要在轉染24h之后才開(kāi)始加G418篩選。因為轉染了外源基因
的細胞代謝負荷較大,增值較慢,時(shí)間長(cháng)了就會(huì )被沒(méi)有外源基因轉入的細胞所淹沒(méi),導致篩選不出陽(yáng)性克隆。
4. 隨著(zhù)細胞代謝,G418的濃度和活性都會(huì )下降,應每3~5天更換一次含有G418的篩選液,這時(shí)濃度可以降至200μg/ml。
5.加藥篩選約5~7天左右,細胞會(huì )大量死亡,為了減少死亡細胞對陽(yáng)性克隆的不利影響以及增加陽(yáng)性克隆的得到率,可以應用套環(huán)法或刮除法結合有限稀釋法來(lái)篩選陽(yáng)性克隆。加藥后,在高倍鏡下,刮除陰性克隆,消化陽(yáng)性克隆后繼續篩選培養?;蛘哂锰篆h(huán)套住陽(yáng)性克隆,在套環(huán)內加胰蛋白酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一個(gè)新的孔中培養,再用有限稀釋法把陽(yáng)性克隆在96孔板中篩選。
6. 一般經(jīng)過(guò)4周左右的篩選,得到的陽(yáng)性克隆都比較穩定。但是外源基因如果沒(méi)有整合到基因組中的話(huà),目的基因還是很容易丟失的,再次篩選往往是必不可少的,經(jīng)過(guò)2次以上的篩選之后才能找到遺傳穩定的細胞克隆。
7.盡量避免污染。
8.為了您的健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
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