產(chǎn)品名稱(chēng)：紫外法蛋白定量試劑盒
規格：250T
貨號：XG-RY2455
儲存條件：室溫,12個(gè)月
用途：紫外光吸收法或呈紫外分光光度法定量檢測總蛋白含量
注意事項：優(yōu)點(diǎn)是：操作迅速、簡(jiǎn)便,不易受低濃度鹽類(lèi)的干擾；缺點(diǎn)是與標準蛋白中酪氨酸、色氨酸含量差異較大的蛋白質(zhì),準確性較差。樣品中含有嘌呤、嘧啶及核酸會(huì )干擾檢測結果。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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紫外法蛋白定量試劑盒250T
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250T
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XG-RY2455
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型，培養基，生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應性曲線(xiàn)，來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL；植物細胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過(guò)夜；注：對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類(lèi)型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密，其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細胞類(lèi)型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi)：
1、化學(xué)成分類(lèi)：標準物質(zhì)，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪)，以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi)：與目錄A相似的標準物質(zhì)，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類(lèi)：以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì)，如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi)：以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì)，如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi)，例如，在化學(xué)成分類(lèi)中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中；在化學(xué)成分類(lèi)別中，標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi)；單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液；這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
成纖維生長(cháng)因子結合蛋白1(FGFBP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒青霉PSMG1/PAC1 Antibody
成纖維生長(cháng)因子結合蛋白2(FGFBP2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒金針菇（毛柄、冬菇）SIRPα/SHPS1 (D6I3M) Rabbit mAb
成纖維生長(cháng)因子受體底物2(FRS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希SignalSilence® PTP1B siRNA II
成纖維生長(cháng)因子受體底物3(FRS3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒牛瘟病Artemis (D7O8V) Rabbit mAb
遲現抗原(VLA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 芽孢桿p130 Cas (E1L9G) Rabbit mAb
穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒異常漢遜酵母CYP3A4 (D9U6N) Rabbit mAb
卵泡受體(FSHR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 蘇云金芽孢桿錫盧亞種UBE1L2/UBA6 Antibody
垂草扁桃酸(VMA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 甲基桿屬TRIM33 (E1N2Z) Rabbit mAb
角質(zhì)轉谷氨酰酶(TGM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒根瘤PGD Antibody
垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體 (PACAPR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒寄生曲霉ATP-Citrate Lyase (D1X6P) Rabbit mAb
肝配蛋白A受體10 (EPHA10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒偽假蒼黃PSMC5/TRIP1 Antibody
雌受體β(ERβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 多主葡萄殼NUP98 (C39A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
雌受體α(ERα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 無(wú)二酸檸檬酸桿LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
雌誘導蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒木賊鐮孢Phospho-4E-BP1 (Thr70) (D7F6I) Rabbit mAb
肝配蛋白A5 (EFNA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒香菇Phospho-p90RSK (Ser380) (D5D8) Rabbit mAb (PE Conjugate)
紫外法蛋白定量試劑盒250TⅤ型膠原(多肽)Anti-CDKL3 Antibody豬V-Myc骨髓瘤病癌基因同源物（MYC）elisa檢測試劑盒
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