產品屬性：
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產品名稱
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規格
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貨號
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BBT-氯化鈉緩沖液 500ml
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500ml
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XG-RY2594
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產品名稱：BBT-氯化鈉緩沖液
規格：500ml
貨號：XG-RY2594
儲存條件：4℃,6個月
用途：
注意事項：巴bi妥鈉、氯化鈉、明膠和鹽酸
公司產品僅供科研實驗、不得臨床。
標準溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類：
1、化學成分類：標準物質，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪)，以一種或多種化學或物理化學特性值表征。
2、生物和臨床特性類：與目錄A相似的標準物質，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類：以一種或多種物理特性值表征的標準物質，如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類：以一種或多種工程特性值表征的標準物質，如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類，例如，在化學成分類中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中；在化學成分類別中，標準物質還可進一步被分為單一成分的標準物質和基體標準物質兩大類；單一成分的標準物質是純物質(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質的溶液；這類標準物質的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
溶液的配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；植物細胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
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