產(chǎn)品名稱(chēng):醋酸鹽緩沖液
規格:100ml
貨號:XG-RY2596
儲存條件:4℃,12個(gè)月
用途:
注意事項:醋酸銨、鹽酸、氨水,濃度為3.25M。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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醋酸鹽緩沖液 100ml
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100ml
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XG-RY2596
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
蛋白激酶C-β1(PKCb1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鏈球屬Smac/Diablo (79-1-83) Mouse mAb
蛋白激酶C-δ1(PKCd)酶聯(lián)吸附測定試劑盒微白螺孢HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb (Biotinylated)
蛋白激酶C-ε(PKCe)酶聯(lián)吸附測定試劑盒細鏈格孢GFP (4B10) Mouse mAb
蛋白激酶C-γ(PKCg)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉GFP (D5.1) XP® Rabbit mAb
蛋白激酶C-ο(PKCi)酶聯(lián)吸附測定試劑盒煙曲霉GFP (D5.1) XP® Rabbit mAb
蛋白激酶C-θ(PKCq)酶聯(lián)吸附測定試劑盒乳桿屬SimpleChIP® ChIP-seq Multiplex Oligos for Illumina® (Single Index Primers)
蛋白激酶C-ζ(PKCz)酶聯(lián)吸附測定試劑盒側耳Erlin-1 Antibody
蛋白激酶D1(PKD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒戴爾根霉Erlin-2 Antibody
蛋白激酶D2(PKD2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒第三梭Death Receptor Antibody Sampler Kit II
蛋白激酶抑制因子α(PKIa)酶聯(lián)吸附測定試劑盒棒曲霉MUC16 Antibody
蛋白激酶抑制因子β(PKIb)酶聯(lián)吸附測定試劑盒毛木耳Caspase-3 (8G10) Rabbit mAb (HRP Conjugate)
蛋白激酶抑制因子γ(PKIg)酶聯(lián)吸附測定試劑盒銅綠假單胞EGF Receptor (T43) Antibody
蛋白激酶N1(PKN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希氏桿Akt2 (5B5) Rabbit mAb
AMP活化的蛋白激酶N1(PRKAa1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒路德酵母Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb
蛋白磷酸酶(PP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 藍色犁頭霉Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb
醋酸鹽緩沖液 100ml辣根過(guò)氧化物酶標記羊抗人IgAAnti-ITPKB Antibody小鼠Rap鳥(niǎo)嘌呤交換因子2(RAPGEF2)elisa檢測試劑盒
熒光素APC標記羊IgG(流式同型對照)Anti-JAK1 Antibody小鼠RasGTP酶激活蛋白(RasGAP)elisa檢測試劑盒
羅丹明標記人血白蛋白Anti-JAK2 Antibody小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)elisa檢測試劑盒
(親和純化)人IgMAnti-JAKMIP2 Antibody小鼠孕酮受體(PGR)elisa檢測試劑盒
兔抗HRPAnti-JAK3 Antibody小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa檢測試劑盒
(親和純化) 人IgGAnti-JAK2 Antibody小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) elisa檢測試劑盒
(親和純化) 人分泌型IgAAnti-JAM A pY280 Antibody小鼠信號識別顆粒(SRP10)elisa檢測試劑盒
生物素化人IgGAnti-JMJD5 Antibody 小鼠血小板/內皮粘附分子(PECAM1)elisa檢測試劑盒