HGC-27+YFP人胃癌細胞黃色熒光標記

商品屬性：

商品介紹：

細胞介紹：

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶 YFP 基因。

細胞特性

1） 來源：人胃癌

2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細胞數

4） 規格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

5) 用途：僅供科研使用。

細胞篩選：

該細胞為穩定轉染 YFP 的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其 YFP 熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。 建議收到細胞后至少傳 3 代，凍存留種后再進行篩選。

初次進行細胞篩選時，建議加入終濃度為 1ug/ml 嘌呤霉素的培養基維持培養，若無細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含 2ug/ml 嘌呤霉素的培養基繼續篩選，以此類推，至高濃度為 5ug/ml。

若篩選過程中，漂浮細胞大于 60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約 80%，可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入 5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥培養基正常培養。

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養瓶中添加完全培養基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3） 細胞凍存: 
收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

注意事項：

1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。

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