操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長期保存
方法二：使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無需自己配制，無需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒問題后再批量應用。
細胞特性
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產品名稱
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J82人膀胱移行細胞癌
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英文名稱
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J82:J82
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分類
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人細胞系
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貨號
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XG-X3378
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組織來源
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器官：膀胱；：移行細胞癌
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形態
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上皮細胞樣
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生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
生長培養基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 J82細胞源自一名58歲患有膀胱移行細胞癌的白人男性。J82細胞內無橋粒，有大量粗面內質網及突出絨毛，可表達ras基因。
年齡（性別） 男；58歲
組織來源 器官：膀胱；：移行細胞癌
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 膀胱癌細胞
生物等級 1
致瘤性 Yes, in nude mice.
抗原表達情況 HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5;
Blood Type A
保藏機構 ATCC; HTB-1
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
公司正在出售的產品：
扭轉原腸胚形成源蛋白1抗體 TWSG1
前列腺素F2a受體抗體PGF2αR PTGFR
G氨基丁酸受體γ3/GABAA Rγ3抗體 GABRG3
G蛋白偶聯受體GPR110蛋白抗體 GPR110
異染色體源蛋白1抗體 CBX1
原癌基因M-ras抗體 MRas
泛素蛋白連接酶L3抗體 Ube2L3
肥大細胞類胰蛋白酶重組兔單克隆抗體 Mast Cell
Tryptase
微管相關蛋白抗體 Tau
細胞表面趨化因子受體7重組兔單克隆抗體 CCR7
SIDT1蛋白抗體 SIDT1
TIGD1蛋白抗體 TIGD1
AF680標記的DNA修復蛋白Rad50抗體 RAD50, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標記的孤兒核受體蛋白Nur77抗體 Nur77, Alexa
Fluor 750 conjugated
拮抗凋亡轉錄因子重組兔單克隆抗體 AATF
跨膜蛋白204抗體 TMEM204
CREB蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
J82人膀胱移行細胞癌動物組織/細胞RNA提取試劑盒 50次
通用型亮（leucine）含量比色法定量檢測試劑盒
小鼠半乳凝素4(GAL4)elisa檢測試劑盒
人Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)elisa分析檢測試劑盒
細胞糖原磷酸化酶a（GLYCOGEN
PHOSPHORYLASE）活性
小鼠碳酸酐酶2(CA-2)elisa檢測試劑盒
大鼠降鈣素原(PCT)elisa檢測試劑盒
植物中脂氧合酶 （LOX)測試盒
小鼠甲狀腺球蛋白(TG)elisa檢測試劑盒
膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T
植物還原型甘肽（GSH）濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒
組織相容性抗原DQA2抗體
HLA-DQA2
肺α/β水解酶蛋白3抗體
ABHD3