人惡性黑色素瘤細胞;A375-LUC-EGFP

商品屬性：

商品介紹：

細胞別稱；A375-eGFP；人惡性黑色素瘤細胞-eGFP；人惡性黑色素瘤細胞-綠色熒光蛋白標記

種屬來源；人

組織來源；黑色素瘤

生長特性；貼壁生長

細胞形態；上皮細胞樣

背景簡介；A375-eGFP是在 A375細胞上用慢病毒標記上eGFP，可以顯示綠色熒光，帶有嘌呤霉素抗性。 A375源自一位54歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。

生物等級；1

細胞規格；1x106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機構；ATCC; CRL-1619 ATCC; CRL-7904 BCRC; 60039 BCRJ; 0278

培養基；90% DMEM+10% FBS+PS+1.0ug/ml puro

培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養瓶中添加完全培養基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3） 細胞凍存: 
收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

注意事項：

1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。

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