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人腎癌細胞 +luc;786-O-plv-luc-BSD

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  • 產品名稱:人腎癌細胞 +luc;786-O-plv-luc-BSD
  • 產品型號:XG-X10055
  • 產品展商:西格
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簡單介紹

人腎癌細胞 +luc;786-O-plv-luc-BSD公司正在出售的產品:C166;小鼠血管內皮細胞 大鼠晚期氧化蛋白產物(AOPP)elisa含量試劑盒 體液氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量檢測試劑盒 豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)elisa分析檢測試劑盒 細胞MAPK蛋白表達熒光定量酶聯試劑盒

產品描述

操作步驟:


步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2:離心收集對數生長期的細胞(貼壁細胞消化下來離心,懸浮細胞直接離心,轉速1200rpm或250g,時間3min)
步驟3:用配制好的凍存液重懸細胞,按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中,擰緊管蓋,做好標記
步驟4:凍存管放入凍存盒,凍存盒放入-80℃冰箱過夜(24h)
步驟5:凍存管從凍存盒取出,轉移至液氮長期保存

方法二:使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液,無需自己配制,無需降溫盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有細胞都適用于這種凍存液,使用前必須做凍存測試,沒問題后再批量應用。

細胞特性

產品名稱

人腎癌細胞 +luc;786-O-plv-luc-BSD

英文名稱

786-O-PLV-LUC-BSD

分類

人細胞系

貨號

XG-X10055

組織來源

形態

上皮細胞樣

細胞別稱;786-O-PLV-LUC-BSD;人腎透明細胞腺癌細胞株-熒光素酶標記;腎透明細胞腺癌細胞-PLV-LUC-BSD

種屬來源;人

組織來源;腎

生長特性;貼壁生長

細胞形態;上皮細胞樣

細胞代數;p3-p8

背景簡介;Luciferase 786-O細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。786-O-LUC細胞株性狀穩定,培養時不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。786-O [786-0]細胞源自一個原發性透明細胞癌;786-O [786-0]細胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂內生長。786-O [786-0]細胞**的一個PTH樣的多肽與乳癌和肺癌中的肽相似。這個多肽的N端與PTH相似,活性與PTH相似,分子量為6000道爾頓。

生物等級;1

細胞規格;1x10        6cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

保藏機構;ATCC; CRL-1932 BCRC; 60243

培養基;1640+10%FBS+PS+1.0ug/ml BSD

培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。                      
一.培養基及培養凍存條件準備
1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

 細胞處理

1) 凍存細胞的復蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

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