細胞特性
生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
生長(cháng)培養基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 NCTC clone 929 [L cell, L-929,
derivative of Strain L-929]細胞是1948年3月建立的細胞系L的克隆株；細胞系L是早建立的連續培養細胞系之一，而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L-929]是早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松結締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L，第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L-929]。
年齡（性別） 雄性，100日齡
組織來(lái)源 未知
細胞類(lèi)型 自發(fā)永生化細胞
生物等級 1
倍增時(shí)間 ~28-36小時(shí)
致瘤性 Yes, in immunosuppressed mice.
保藏機構 ATCC; CCL-1 ATCC;
CRL-6364BCRC; 60091 BCRJ; 0188 DSMZ; ACC-2 ECACC; 85011425 ECACC; 85103115
ECACC; 88102702
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
細胞PAR-2蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
眼部白化病相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體
OA1
9號染色體開(kāi)放閱讀框84抗體
新德里超級金屬β-內酰胺酶-1(NDM-1)elisa生化檢測試劑盒
NDM-1 ELISA kit
人白介素3(IL-3)elisa生化檢測試劑盒
HumanInterleukin3ELISAKIT
果菜甲酸比色法定量檢測試劑盒
小鼠C4結合蛋白α(C4BPα)elisa檢測試劑盒
大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa檢測試劑盒
C9orf84
精子形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體 Anti-TSARG7
蛋白激酶A抗體 Anti-PKA/PKAcat/PKACB
肝糖原磷酸化酶抗體 Anti-PYGL
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體 Anti-phospho-CK II beta (Ser209)
Cy5標記的小鼠抗牛IgG H&L
NCTC clone
929 [L cell, L-929]小鼠成纖維細胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy5
線(xiàn)粒體二羧酸載體蛋白11抗體
SLC25A11
人CC趨化因子受體1(CCR1)elisa生化檢測試劑盒
HumanCCR1ELISAKit
小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)elisa生化檢測試劑盒
OVAsIgGELISAKit
大鼠SHC轉化蛋白1(SHC1)elisa生化檢測試劑盒
SHC1 ELISA kit
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa生化檢測試劑盒
Casp-12ELISAKit
DNA南方雜交印跡消除試劑盒
BL21DE3感受態(tài)細胞 20 x 100μl
微型RNA（miRNA）擴增試劑盒
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa檢測試劑盒
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。