細胞特性
細胞別稱；9L/lacZ；大鼠膠質肉瘤細胞
種屬來源；大鼠
年齡性別；雄性
組織來源；腦，膠質細胞
背景簡介；9L/lacZ細胞株1989年從9L細胞株（大鼠硝基脲誘導的膠質瘤細胞株）發展而來。 用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來G418抗性的Tn5新霉素基因BAG復制缺陷的逆轉錄病毒載體感染9L細胞株。 細胞在G418存在下培養14天，克隆，并檢測beta-半乳糖苷酶**。 9L/lacZ產生高水平的酶，選擇其進行后續研究。
細胞持續表達lacZ報告基因產物，從E. coli衍生來的beta-半乳糖苷酶，從而可以通過組織切片的組織化學染色來鑒定單個腫瘤細胞。 同一片子上的細胞和其它響應細胞也可以通過雙標記抗體進行鑒定。
染色細胞和背景的對比有益于圖像分析。 這是少數允許量化分析的大腦微觀腫瘤模型中的一種。 這種腫瘤模仿了人類大腦腫瘤的生長和傳播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表達十分穩定，但細胞培養數月后應該重新進行克隆。
生長特性；貼壁生長
細胞形態；成纖維細胞樣
細胞代數；10代以內
細胞規格；1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無
保藏機構；ATCC; CRL-2200
培養基；90%DMEM+10%FBS+PS
培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
公司正在出售的產品：
IFN-β/IFNB檢測試劑盒
魚11-酮睪酮(KT)elisa分析檢測試劑盒
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人吡哆醛/吡哆醇維生素B6磷酸酶(PDXP)elisa分析檢測試劑盒
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蛋白提取/檢測
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宮頸癌原癌基因2抗體
LETMD1
β內酰胺酶抗體
beta lactamase TEM
SYF2蛋白抗體 Anti-SYF2
RRAD抗體 Anti-RRAD
干細胞轉錄因子NANOGP8抗體 Anti-NANOGP8
鋅指蛋白ZBTB12抗體 Anti-ZBTB12
大鼠膠質肉瘤細胞；9L/lacZ鉀氯離子轉運蛋白3抗體
SLC12A6
CPAMD8蛋白抗體
CPAMD8
突觸囊泡蛋白抗體 Anti-SYNPR/Synaptoporin
蛋白激酶A調節亞基a1抗體 Anti-PRKAR1
腺苷酸環化酶激活肽受體1抗體 Anti-PACAP R1/PACAP receptor
1
磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC2抗體 Anti-Phospho-TORC2 (Ser171)
兔抗小鼠IgG H&L抗血清
Rabbit Anti-Mouse
IgG H&L whole serum
鋅指蛋白786抗體
LIN7B蛋白抗體
LIN7B
膀胱癌相關蛋白BLCAP抗體
BLCAP
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長期保存
方法二：使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無需自己配制，無需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒問題后再批量應用。